【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：小鼠食管上皮細胞操作步驟
2.組織來源：食管組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
小鼠食管上皮細胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統發生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。在發育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變為復層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在食管與胃賁門交界處，復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋，其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯合在一起產生有效滲透屏障，防止食管內容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細胞的基質外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內規律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。
本公司的小鼠食管上皮細胞采用機械分離法結合組織貼塊法，并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
Alpha (TNFa) 96T Y16964 Mus musculus (Mouse)
腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) 96T Y16965 Rattus norvegicus (Rat)
血小板生成素(TPO)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Thrombopoietin (TPO) 96T Y16966 Homo sapiens (Human)
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand (TRAIL) 96T Y16967 Homo sapiens (Human)
*型纖溶酶原激活因子(uPA)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase (uPA) 96T Y16968 Homo sapiens (Human)
血管內皮生長因子A(VEGFA)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) 96T Y16969 Canis familiaris; Canine (Dog)
血管內皮生長因子A(VEGFA)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) 96T Y16970 Homo sapiens (Human)
血管內皮生長因子A(VEGFA)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) 96T Y16971 Mus musculus (Mouse)
血管內皮生長因子A(VEGFA)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) 96T Y16972 Rattus norvegicus (Rat)
血管內皮生長因子C(VEGFC)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor C (VEGFC) 96T Y16973 Homo sapiens (Human)
*3(KLK3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法
Anti-A/H2N2 /FITC 熒光素標記兔抗甲2（H2N2）亞型流感抗體（甲2型）IgG 0.2ml
Anti-H2AX/FITC 熒光素標記組蛋白H2AX抗體IgG 0.2ml
Anti-Haase/FITC 熒光素標記透明質酸酶/*抗體IgG 0.2ml
Anti-HA tag/FITC 熒光素標記HA tag標簽抗體IgG 0.2ml
Anti-HA tag/HRP 辣根過氧化物酶標記HA tag標簽抗體IgG 0.2ml
Anti-HA tag/FITC 熒光素標記HA tag標簽抗體IgG 0.2ml
Anti-HA tag/HRP 辣根過氧化物酶標記HA tag標簽抗體IgG 0.2ml
Anti-HAI-1/FITC 熒光素標記肝細胞生長因子激活物抑制因子抗體IgG 0.2ml
Anti-HBA1/FITC 熒光素標記人類血紅蛋白α1抗體IgG 0.2ml
Anti-DcR1/TRAIL-R3/TRID/LIT 熒光素標記DcR1抗體IgG 0.2ml
Anti-HBME-1 /FITC 熒光素標記間質細胞HBME1蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-DcR2/CD264 /FITC 熒光素標記抗誘捕受體2抗體IgG 0.2ml
Anti-DcR3/FITC 熒光素標記抗誘捕受體3抗體IgG 0.2ml
Anti-HBV/pre S1/S2 protein /FITC 熒光素標記抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗體IgG 0.2ml
Anti-HCCR-1/FITC 熒光素標記人基因/bri3結合蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti- Alpha-HCG/FITC 熒光素標記α亞基人絨毛膜*抗體IgG 0.2ml
Anti- Beta-HCG /FITC 熒光素標記抗人beta亞基人絨毛膜*抗體 IgG 0.2ml
Anti-HCFHrp/BTA/FITC 熒光素標記抗膀胱腫瘤抗原IgG 0.2ml
Anti-Hck/FITC 熒光素標記造血細胞激酶抗體IgG 0.2ml
Anti-HCMV PP65/HHV5 PP65/FITC 熒光素標記人巨細胞病毒PP65/CMV低基質磷脂蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-HCMV UL23/HHV5 UL23/FITC 熒光素標記人巨細胞病毒UL23抗體IgG 0.2ml
Anti-HCMV UL49/FITC 熒光素標記人巨細胞病毒UL49抗體IgG 0.2ml
Anti-HCN4/FITC 熒光素標記環化核苷酸調控陽離子通道蛋白亞型4IgG
