【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：小鼠子宮平滑肌細胞操作步驟
2.組織來源：子宮組織
3.產品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠子宮平滑肌細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生膈及會陰中心腱等結構維持，這些結構受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚，由成束或成片的平滑肌組成，肌束間以結締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能，收縮受激素的調節(jié)，其收縮活動有助于向輸卵管運送、排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管，如果平滑肌層細胞過度生長，勢必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，體外培養(yǎng)平滑肌細胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機制。子宮平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。子宮平滑肌細胞的主要功能：①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài)，在孕期能zui大化的擴張子宮容積，保證胎兒孕育環(huán)境；②平滑肌細胞有收縮舒張能力，在時能形成生理性的縮腹環(huán)，推動胎兒向下移動，輔助。
本公司的小鼠子宮平滑肌細胞采用*-膠原酶聯(lián)合消化法結合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H]、FBS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片，五天內有問題公司負責重發(fā)，超過五天時限至一個月內重發(fā)細胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
10XMOPS
超敏可逆型蛋白染色試劑盒
可逆型蛋白轉移膜染色液
可逆型蛋白轉移膜染色液
可逆型蛋白快速染色試劑盒
DNA分子量標準參照片斷（bp）：100 、200、300、400、500、600bp
DNA分子量標準參照片斷（bp）：100 、300、500、700、900、1200bp
DNA分子量標準參照片斷（bp）：200 、500、800、1200、2000、3000、4000bp
DNA分子量標準參照片斷（bp）：100 、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500bp
DNA分子量標準參照片斷 （bp）：200 、400、600、800、1000、1500bp
質粒小提試劑盒
質粒小提試劑盒
膠上DNA回收試劑盒
膠上DNA回收試劑盒
DNA膠回收試劑盒
動物DNAout（動物*）
血液DNAout(血液*)
植物DNAout（植物*）
病毒DNAout(病毒DNA快速提取液)
革蘭氏陰性細菌DNAout提取試劑盒
*
酵母基因組提取試劑盒
質粒小量提取試劑盒
凝膠回收試劑盒
DNA產物純化試劑盒
植物基因組提取試劑盒
*
動物細胞/*
T4 DNA連接酶
T4 DNA連接酶
T4 DNA 激酶
T4 DNA 激酶
重組Taq DNA 聚合酶
重組Taq DNA 聚合酶
重組Taq DNA 聚合酶
重組Taq DNA 聚合酶
動物RNAout(快速動物總RNA提取試劑)
植物RNAout（植物RNA提取試劑）
血液RNAout(血液總RNA提取試劑)
病毒RNAout(病毒RNA提取試劑)
細菌RNA提取試劑
RNAin（非凍型RNA樣品保存液）
總RNA提取試劑
液體樣品RNA提取試劑
RNA高效保存液
Anti-E2F1/FITC 熒光素標記轉錄因子E2F-1抗體IgG 0.2ml
Anti-E2F2/FITC 熒光素標記轉錄因子E2F-2抗體IgG 0.2ml
Anti-E2F3/FITC 熒光素標記轉錄因子E2F-3抗體IgG 0.2ml
Anti-E2F4/FITC 熒光素標記轉錄因子E2F-4抗體IgG 0.2ml
Anti-E2F5/FITC 熒光素標記轉錄因子E2F-5抗體IgG 0.2ml
Anti-E2F6/FITC 熒光素標記抗轉錄因子E2F-6抗體IgG 0.2ml
Anti-E2 tag/FITC 熒光素標記E2 tag標簽抗體IgG 0.2ml
Anti-E2 tag/HRP 辣根過氧化物酶標記E2 tag標簽抗體IgG 0.2ml
Anti-E7 protein/FITC 熒光素標記人瘤病毒16型E7抗體IgG 0.2ml
Anti-EAAT1/Glast /FITC 熒光素標記膠質細胞*運載蛋白1 抗體IgG 0.2ml
Anti-EAAT2/FITC 熒光素標記抗膠質細胞*運載蛋白2抗體IgG 0.2ml
Anti-EAAT3/FITC 熒光素標記抗膠質細胞*運載蛋白3抗體IgG 0.2ml
Anti-EAG1/FITC 熒光素標記鉀離子通道蛋白EAG1抗體IgG 0.2ml
Anti-EBNA-3/FITC 熒光素標記EB病毒核抗原-3抗體IgG 0.2ml
Anti-E-cadherin/FITC 熒光素標記E-鈣粘附分子抗體IgG 0.2ml
Anti-ECE1/FITC 熒光素標記內皮素轉化酶1抗體IgG 0.2ml
Anti-ECE2/FITC 熒光素標記抗內皮素轉化酶2抗體IgG 0.2ml
Anti-ECG2/FITC 熒光素標記食道癌相關基因抗體IgG 0.2ml
Anti-ECM1/FITC 熒光素標記細胞外基質蛋白1抗體IgG 0.2ml
Anti-ECP/FITC 熒光素標記抗嗜酸性粒細胞陽離子蛋白抗體IgG 0.2ml
