1.產品名稱：小鼠腎小管上皮細胞實驗方法
2.組織來源：腎組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
小鼠腎小管上皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、*等，以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性*3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環境的穩定，使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態結構、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱為近曲小管，位于皮質迷路內，于腎小體附近高度蟠曲；遠端小管曲部也稱為遠曲小管，位于皮質迷路內。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞，腎小管上皮細胞的分離、培養是研究腎臟疾病的一項重要技術，目前該細胞分離方法有酶分離法、化學分離法篩網分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能：①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非營養物質進入終尿；③細胞能分泌炎癥介質如細胞因子和趨化因子，通過產生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原，這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發生。隨著對腎間質纖維化機制研究的日漸加深，腎小管上皮細胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視。因此，提供良好的腎小管上皮細胞模型，在腎小管間質疾病的發病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。
本公司的小鼠腎小管上皮細胞采用先機械研磨過不銹鋼網篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化，結合上皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經Cytokeratin-18/PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
人α半乳糖基抗體
人αN已酰氨基葡糖苷酶
人α2纖溶酶抑制物
人高香草酸
人*腺嘌呤二核苷酸磷酸
人鈣粘蛋白相關的神經受體1
人毛細血管擴張性共濟失調突變基因
人芳香烴受體
人特異性巨噬細胞武裝因子
人促有絲分裂因子
人轉錄因子抗體-1
人抗鼠抗體
人鈣離子通道抗體
人溴脫氧核苷*
人纖維母細胞表面抗原
人分泌性白細胞蛋白酶抑制因子
人阿黑皮素原
人不對稱二甲基*
人血清素/血清胺
人細胞毒素
人α突觸核蛋白
人糖鏈抗原19-9
人水蛭素
人*
人上皮特異性抗原
人上皮膜抗原
人凝聚素
人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體
人抗著絲點抗體
人肌細胞生成素
人A組鏈球菌菌壁多糖抗體
人活化蛋白C抵抗素
人N端外顯肽
人分泌成分
人二磷酸腺苷
人蛋白聚糖
人吡啶酚
人5羥基吲哚乙酸
人12羥二十烷四烯酸
人羥*
人一氧化氮
人上皮中性粒細胞活化肽78
人*
人*6
人可溶性P選擇素
人基質金屬蛋白酶抑制因子1
人*
人*1
人*12
protein-2)/FITC 熒光素標記抗二氫嘧啶酶樣2抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-CRMP-2 (Thr514) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體IgG 0.2ml
Anti-CRP/Biotin *化C-反應蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-CRP/FITC 熒光素標記C-反應蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-CRP/HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人C-反應蛋白單克隆抗體IgG 0.2ml
Anti-CRTAM/FITC 熒光素標記CRTAM抗體IgG 0.2ml
Anti-C-SKI/FITC 熒光素標記抗C-SKI抗體IgG 0.2ml
Anti-CSIG/FITC 熒光素標記細胞衰老抑制基因抗體IgG 0.2ml
Anti-CSP/FITC 熒光素標記環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體IgG 0.2ml
Anti-CT/FITC 熒光素標記降鈣素抗體IgG 0.2ml
Anti-CT-1/CTF1/FITC 熒光素標記心肌營養素1抗體IgG 0.2ml
Anti-CT-R/FITC 熒光素標記降鈣素受體抗體IgG 0.2ml
Anti-CSMD1/FITC 熒光素標記抑癌基因CSMD1抗體IgG 0.2ml
Anti-CTBP1/FITC 熒光素標記C端結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
Anti-CT DNA /FITC 熒光素標記兔抗小牛胸腺DNA 抗體IgG 0.2ml
Anti-CT DNA /Gold 膠體金標記兔抗小牛胸腺DNA 抗體IgG(10nm/15nm) 0.2ml
Anti-CTGF/FITC 熒光素標記結締組織生長因子抗體IgG 0.2ml
Anti-CTLA-4/CD152 /FITC 熒光素標記淋巴細胞相關抗原4/細胞毒性T細胞抗原-4抗體IgG 0.2ml
