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小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞操作步驟

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更新時間：2017-07-26 16:10:16瀏覽次數(shù)：435次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  ATCC細(xì)胞

動物細(xì)胞

人源免疫細(xì)胞及干細(xì)胞

細(xì)胞系

原代細(xì)胞

轉(zhuǎn)化細(xì)胞

人正常組織來源細(xì)胞

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上海邦景實業(yè)有限公司

經(jīng)營模式：經(jīng)銷商

商鋪產(chǎn)品：9896條

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聯(lián)系人：陳小姐（銷售）

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產(chǎn)品簡介

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞操作步驟售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞操作步驟

2.組織來源：關(guān)節(jié)軟骨組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分離自關(guān)節(jié)軟骨組織；關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨，表面光滑、呈淡藍(lán)色、有光澤，它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架，這種框架呈半環(huán)形，類似拱形球門，其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上，上端朝向關(guān)節(jié)面，這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來，同時當(dāng)受到壓力時候，還可以有少許的變形，起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間，散在分布著軟骨細(xì)胞，軟骨細(xì)胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細(xì)胞組成，這些軟骨細(xì)胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配，也沒有血管，其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得，而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中，關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運(yùn)動，使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行，所以關(guān)節(jié)運(yùn)動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行，越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形、染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)，這些關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

本公司的小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞采用膠原酶聯(lián)合*消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

DMEM-F12、FBS、軟骨細(xì)胞生長添加劑、Vitamin Supplements、Penicillin、Streptomycin等

細(xì)胞名稱	小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞操作步驟
規(guī)格	5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
價格	來電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
大鼠細(xì)胞間粘附分子3
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1
人抗BB抗體
小鼠*
人抗平滑肌抗體
小鼠促甲狀腺素
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子
小鼠甲基化酶
人抗肝細(xì)胞膜抗體
大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體
大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白
人抗肝特異性脂蛋白抗體
人抗眼肌抗體
大鼠血小板衍生生長因子
小鼠脂蛋白脂酶
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b
大鼠氧化低密度脂蛋白
人抗補(bǔ)體1q抗體
人抗內(nèi)因子抗體
小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽
大鼠血小板活化因子
大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II
人抗磷脂抗體
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM
大鼠Ⅲ型膠原
人抗組蛋白抗體
抗髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(人)
人晶體蛋白α
大鼠C反應(yīng)蛋白
小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB
大鼠組織多肽抗原
小鼠甲狀腺素抗體
人晶體蛋白β
人抗膠原蛋白抗體
大鼠組織型纖溶酶原激活劑
小鼠抗促甲狀腺素受體抗體
兔抗人、大、小鼠磷酸化Bcl-2抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-Bcl-2 (p-Ser70) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Bcl-2抗體IgG   0.2ml
Anti-Bcl-6/Bcl-5/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌基因Bcl-6抗體IgG   0.2ml
Anti-Bcl-10/CLAP/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗體IgG   0.2ml
Anti-Bcl-10(phospho Ser218)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Bcl-10抗體IgG   0.2ml
Anti-Bcr/CD3D/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠T淋巴細(xì)胞受體抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化T淋巴細(xì)胞受體抗體IgG   0.2ml
Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21 /FITC 熒光素標(biāo)記三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體IgG   0.2ml
Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 熒光素標(biāo)記緩激肽B2受體抗體IgG   0.2ml
Anti-BDNF/FITC 熒光素標(biāo)記BDNF蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-BECN1/FITC 熒光素標(biāo)記一種抑癌基因抗體IgG   0.2ml
Anti-EpCAM/CD326/FITC 熒光素標(biāo)記上皮細(xì)胞特異性EpCAM/CD326蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-Beta-casein( Beta-casein)/FITC 熒光素標(biāo)記 β-酪蛋白(抗體)IgG   0.2ml
Anti-BFGF/FITC 熒光素標(biāo)記堿性成纖維細(xì)胞生長因子抗體IgG   0.2ml
Anti-BGP/FITC 熒光素標(biāo)記骨保護(hù)蛋白/骨鈣素抗體IgG   0.2ml
Anti-Bid/FITC 熒光素標(biāo)記BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-AQP-2/HRP (aquaporin Protein-2) 辣根過氧化物酶標(biāo)記水通道蛋白-2抗體IgG   0.2ml
Anti-BIN1/FITC 熒光素標(biāo)記橋連整合因子蛋白抗體