【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：小鼠神經小膠質細胞操作步驟
2.組織來源：腦組織
3.產品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠神經小膠質細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和*溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質細胞是神經膠質細胞的一種，相當于腦和脊髓中的巨噬細胞，是中樞神經系統（CNS）中的*道也是zui主要的一道免疫防線。小膠質細胞大約占大腦中的神經膠質細胞的20%，小膠質細胞不停地清除著中樞神經系統中的損壞的神經，斑塊及感染性物質。無數臨床上和神經病理學研究表明激活的小膠質細胞在神經退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用，如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質細胞會引起神經毒性。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源，如腫瘤壞死因子（TNF），一氧化氮，白介素等有神經毒性的物質。神經小膠質細胞的主要功能：①神經膠質出現在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉化的過程中；②當程序性細胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經系統受損或受到病理損壞時，神經膠質可做為大腦的巨噬細胞；③膠質細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原，能進行Fc介導的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。
本公司的小鼠神經小膠質細胞采用酶消化法結合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數天后經搖床震蕩收集脫落細胞制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經CD11b/c[OX42]免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H]、FBS、膠質細胞生長添加劑、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片，五天內有問題公司負責重發(fā)，超過五天時限至一個月內重發(fā)細胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
人*11
大鼠腎素
大鼠膜聯蛋白Ⅴ
人生長調節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子
小鼠分泌型免疫球蛋白A
人生長調節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子
小鼠血紅素氧合酶2
大鼠抗內皮細胞抗體
大鼠全段甲狀旁腺素
小鼠骨膠原交聯
人美麗線蟲凋亡基因
人胸腺白血病抗原
大鼠牛小腸堿性磷酸酶
小鼠促卵泡素
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽
人腫瘤特異性移植抗原
大鼠肺表面活性物質相關蛋白A
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉
人足細胞標記蛋白/足盂蛋白
大鼠克拉拉細胞蛋白
大鼠腎上腺素
人癌易感蛋白1
小鼠吡啶交聯物
小鼠骨橋素
人T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原
大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG
大鼠補體蛋白3
人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白
小鼠促腎上腺皮質激素
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B
大鼠*
人硫氧化還原蛋白
人窖蛋白
大鼠多巴胺
小鼠轉鐵蛋白受體
人普通急性淋巴細胞白血病抗原
大鼠高靈敏度促甲狀腺激素
小鼠半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C
人黑色素細胞刺激素
0.2ml
Anti- Beta-arrestin 2/FITC 熒光素標記β-抑制蛋白2抗體IgG 0.2ml
Anti- Beta-Amyloid(1-16) /FITC 熒光素標記β淀粉樣肽（1-16）抗體IgG 0.2ml
Beta-Amyloid(1-28)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽（1-28）抗體IgG 0.2ml
Anti- Beta-Amyloid(1-40)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽（1-40）抗體IgG 0.2ml
Beta-Amyloid 1-40(CT)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽（1-40）C端抗體IgG 0.2ml
Anti- Beta-Amyloid 1-40(CT)mouse/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽 1-40 C端抗體IgG 0.2ml
Anti- Beta-Amyloid 1-42 CT(A Beta1-42)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽1-42 (C端抗體)IgG 0.2ml
Anti- Beta-Amyloid(25-35)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽（25-35）抗體IgG 0.2ml
Beta-Amyloid(31-35)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽（31-35）抗體IgG 0.2ml
Anti-14-3-3/FITC 熒光素標記14-3-3蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-14-3-3 ζ(phospho Ser58)/FITC 熒光素標記磷酸化14-3-3 ζ抗體IgG 0.2ml
Anti-2,4-D/FITC 熒光素標記2，4-二氯苯氧乙酸抗體IgG 0.2ml
Anti-4E-BP1/EIF4EBP1/FITC 熒光素標記4E結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
Anti-4EBP1(phospho Ser64) /FITC 熒光素標記磷酸化4E結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
Anti-4EBP1(phospho Thr37/46) /FITC 熒光素標記磷酸化4E結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70)/FITC 熒光素標記磷酸化eIF4E結合蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-14-3-3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記14-3-3抗體IgG 0.2ml
Anti-5-HT/FITC 熒光素標記5-羥色胺抗體IgG 0.2ml
Anti-5-HT/RBITC 紅色羅丹明標記5-羥色胺抗體IgG 0.2ml
Anti-5-HTR1A/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體1A抗
