1.產(chǎn)品名稱：小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法

2.組織來(lái)源：視網(wǎng)膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成，兩層間在病理情況下可分開(kāi)，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。*神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上，而視錐細(xì)胞則在中心凹處zui多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力zui強(qiáng)。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細(xì)胞，大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞的90%，因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來(lái)越多的關(guān)注。在超微結(jié)構(gòu)水平上，Muller細(xì)胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細(xì)胞更高的電子密度，更發(fā)達(dá)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，細(xì)胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位，Muller細(xì)胞形態(tài)也會(huì)有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結(jié)構(gòu)和功能的作用，并調(diào)制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動(dòng)，還能參與多種病理過(guò)程，尤其是眼底增殖性病變，如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等，體外培養(yǎng)Muller細(xì)胞是研究這些增殖性病變途徑之一。

本公司的小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞采用膠原酶消化法和*反復(fù)消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

DMEM[H]、FBS、膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
小鼠N-乙?；?絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-* 
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物 
人白介素12 
人白介素11 
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A 
大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白 
大鼠幽門(mén)螺旋菌IgG 
人白介素10 
小鼠纖連蛋白 
小鼠FMS樣*激酶3 
大鼠雌激素受體 
人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4 
人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3 
小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1 
大鼠β-防御素 
小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2 
大鼠多巴胺D1受體 
人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2 
人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1 
大鼠腎上腺素能a1A受體 
小鼠白介素16 
小鼠白介素3 
人胰島素樣生長(zhǎng)因子2 
大鼠鈣結(jié)合蛋白 
小鼠白介素4 
大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白 
人胰島素樣生長(zhǎng)因子1 
人γ干擾素 
大鼠骨形成蛋白6 
小鼠白介素5 
小鼠層連蛋白/板層素 
人細(xì)胞間粘附分子1 
大鼠淋巴細(xì)胞因子 
人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子 
小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子 
大鼠微量蛋白 
小鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子 
人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子 
大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-* 
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子 
c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit  兔心肌特異性肌鈣蛋白T   96T
LZM (Rabbit Lysozyme) ELISA Kit  兔*   96T
PRL (Rabbit prolactin) ELISA Kit  兔子催乳素   96T
LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit  兔子促黃體激素   96T
ABAb (Rabbit anti-brain tissue antibody) ELISA Kit  兔抗腦組織抗體   96T
p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit  兔p53   96T
BAX (Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein) ELISA Kit  兔Bcl-2相關(guān)X蛋白   96T
ADR (Rabbit adramycin) ELISA Kit  兔*   96T
MMP-2/Gelatinase A (Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA Kit  兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A   96T
OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit  兔抑瘤素M   96T
ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit  兔血管生成素2   96T
ANG- II (Rabbit angiotension II ) ELISA Kit  兔血管緊張素Ⅱ   96T
sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis) ELISA Kit  兔可溶性凋亡相關(guān)因子   96T
6-keto-PGF1a (Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit  兔6酮前列腺素F1a   96T
TXB2 (Rabbit Thromboxane B2) ELISA Kit  兔血栓素B2   96T
VCAM-1/CD106 (Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit  兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1   96T
Fbg (Rabbit Fibrinogen) ELISA Kit  兔血纖蛋白原   96T
D2D (Rabbit D-Dimer) ELISA Kit  兔子D二聚體   96T