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小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間：2017-07-27 14:24:37瀏覽次數(shù)：272次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷(xiāo)售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

1.產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法

2.組織來(lái)源：視網(wǎng)膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成，兩層間在病理情況下可分開(kāi)，稱(chēng)為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。*神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專(zhuān)司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上，而視錐細(xì)胞則在中心凹處zui多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專(zhuān)管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力zui強(qiáng)。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞貼壁后呈單層排列，部分細(xì)胞聚集成團(tuán)，細(xì)胞呈圓形或橢圓形，核圓且相對(duì)透明，有些細(xì)胞膜上伸出短而小的突起；該細(xì)胞為高度分化細(xì)胞，在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞是青光眼病理性損害的主要細(xì)胞，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的死亡可導(dǎo)致視功能不可逆損傷，研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損害的細(xì)胞學(xué)和分子生物學(xué)機(jī)制有利于青光眼發(fā)病機(jī)制的研究。

本公司的小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞采用*-膠原酶聯(lián)合消化法，結(jié)合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)CD90、MAP-2免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

細(xì)胞名稱(chēng)	小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法
規(guī)格	5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
價(jià)格	來(lái)電可享受優(yōu)惠

優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類(lèi)齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專(zhuān)業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買(mǎi)本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶(hù)收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
大鼠抗核膜糖蛋白210抗體
小鼠腎上腺髓質(zhì)素
大鼠可溶性Toll樣受體6
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C
大鼠可溶性Toll樣受體2
小鼠可溶性瘦素受體
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B
大鼠前列腺素F2α
小鼠β內(nèi)啡肽受體
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子
大鼠白三烯E4
小鼠肝脂酶
大鼠*
人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1
小鼠乙型肝炎核心抗體
小鼠乙型肝炎e抗體
大鼠*Ⅻ
人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體
人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4
小鼠乙型肝炎e抗原
大鼠*ⅩⅢ
大鼠*Ⅲ
人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3
小鼠乙型肝炎表面抗體
小鼠二胺氧化酶
大鼠載脂蛋白H
人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1
人腫瘤壞死因子β
小鼠乙型肝炎表面抗原
大鼠白介素2受體
人可溶性Endoglin
人腫瘤壞死因子α
大鼠腎上腺髓質(zhì)素
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ
大鼠β內(nèi)啡肽受體
小鼠活化蛋白C
TRAb(Mouse thyroid stimulating hormone receptor antidoby)ELISA Kit 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體   48T
CA(Mouse catecholamine)ELISA Kit 小鼠兒茶酚胺   48T
IL-27(Mouse Interleukin 27)ELISA Kit 小鼠白介素27   48T
IL-23(Mouse Interleukin 23)ELISA Kit 小鼠白介素23   48T
CT-1(Mouse cardiotrophln 1)ELISA Kit 小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1   48T
Alpha-Fodrin IgG/IgA(Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA)ELISA Kit 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA   48T
AT- III (Mouse Anti-Thrombin III )ELISA Kit 小鼠抗*Ⅲ抗體   48T
NP-Y(Mouse neuropeptide Y) ELISA Kit 小鼠神經(jīng)肽Y   48T
GHRP(Mouse Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽   48T
Gelsolin(Mouse Gelsolin ) ELISA Kit 小鼠凝溶膠蛋白   48T
RANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit 小鼠核因子κB受體活化因子配基   48T
TpP(Mouse thrombus precursor protein) ELISA Kit 小鼠血栓前體蛋白   48T
GnRH(Mouse gonadotropin-releasing hormone) ELISA Kit 小鼠*釋放激素   48T
INH-BGnRH(Mouse inhibin B) ELISA Kit 小鼠抑制素B   48T
TRH(Mouse thyrotropin-releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素釋放激素   48T
CRH(Mouse corticotropin releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素   48T
ISR- Beta(Mouse Insulin Receptor Beta) ELISA Kit 小鼠胰島素受體β   48T