【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產(chǎn)品名稱：小鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞操作步驟
2.組織來源：脈絡膜組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視神經(jīng)部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用，對整個視覺神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養(yǎng)和遮光作用。
本公司的小鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞采用膠原酶-*混合消化法并通過內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS、內(nèi)皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內(nèi)膜細胞等
2、*，專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術(shù)指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負責重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
小鼠血管緊張素Ⅱ
大鼠總膽汁酸
大鼠β2微球蛋白
小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體
人CXC趨化因子配體16
大鼠*結(jié)合蛋白
人CXC趨化因子受體3
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子
大鼠*釋放激素受體抗體
小鼠凋亡誘導因子
人γ干擾素誘導蛋白16/p16
人基質(zhì)細胞衍生因子1a
大鼠主要堿性蛋白
小鼠堿性磷酸酶
小鼠血管生成素4
大鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白
人淋巴細胞趨化因子
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ
大鼠鈣調(diào)磷酸酶
人α干擾素
大鼠白細胞介素33
人可溶性CD86
小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類
小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白
人白介素27
大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體
人白介素28
人白介素29
大鼠凋亡誘導因子
人白介素23
小鼠CD30分子
小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類
人巨噬細胞移動抑制因子
大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體
人組織因子途徑抑制物
小鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體
大鼠堿性磷酸酶
人干擾素誘導蛋白10
小鼠嗜酸粒細胞趨化因子
大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶
人白介素1
大鼠血管生成素4
小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白
人白介素17
NN-T4(Mouse Neonatal Thyroxine)ELISA Kit 小鼠新生甲狀腺素 48T
Amylin(Mouse Amylin) ELISA Kit 小鼠胰淀素 48T
Free-T3(Mouse Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit 小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸 48T
LTC4(Mouse Leukotriene C4) ELISA Kit 小鼠白三烯C4 48T
Cyt-C(Mouse Cytochrome-C) ELISA Kit 小鼠* 48T
FT4(Mouse Free Thyroxine) ELISA Kit 小鼠游離甲狀腺素 48T
Ang- I (Mouse angiotension I ) ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅰ 48T
MC Ab(Mouse melanocyte antibody) ELISA Kit 小鼠黑色素細胞抗體 48T
T4(Mouse thyroxine) ELISA Kit 小鼠甲狀腺素 48T
DPP IV (Mouse dipeptidyl peptldase IV ) ELISA Kit 小鼠二肽基肽酶Ⅳ 48T
C4a(Mouse Complement fragment 4a)ELISA Kit 小鼠過敏毒素/補體片斷4a 48T
T3(Mouse Tri-iodothyronine)ELISA Kit 小鼠三碘甲狀腺原氨酸 48T
C5a(Mouse Complement fragment 5a)ELISA Kit 小鼠補體片斷5a 48T
C3a(Mouse Complement fragment 3a)ELISA Kit 小鼠補體片斷3a 48T
17-OHP(Mouse 17-Hydroxyprogesterone)ELISA Kit 小鼠17羥孕酮 48T
FS(Mouse Follistatin)ELISA Kit 小鼠卵泡抑素 48T
HD(Mouse Histone Deacetylase)ELISA Kit 小鼠組織蛋白去乙酰化酶 48T
E3(Mouse Estriol)ELISA Kit 小鼠雌三醇 48T
ASD(Mouse Androstenedione)ELISA Kit 小鼠雄烯二酮 48T
F-TESTO(Mouse Free Testoterone)ELISA Kit 小鼠
