【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：小鼠骨髓間充質干細胞操作步驟
2.組織來源：骨髓
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
小鼠骨髓間充質干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，zui后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質系統內存在的骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%，含量極低。骨髓間充質干細胞的體外培養條件要求較高，在培養過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。
本公司的小鼠骨髓間充質干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
DMEM-F12、FBS、間充質干細胞生長添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
人紅細胞刺激因子
大鼠血管緊張素Ⅱ
小鼠還原型*
植物吲哚乙酸
大鼠可溶性白介素6受體
兔可溶性凋亡相關因子
人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子
兔6酮前列腺素F1a
小鼠肌鈣蛋白T
大鼠吡啶酚
麥胚凝集素/凝集蛋白
人生長激素釋放因子
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2
小鼠c-fos
荊豆凝集素
兔血栓素B2
人巨噬細胞趨化因子
小鼠c-jun
人α/β干擾素受體
大鼠骨堿性磷酸酶
槐凝集素
兔血管內皮細胞粘附分子1
花生凝集素
人B細胞生長因子
兔血纖蛋白原
大鼠凝聚素
小鼠抗透明帶抗體
人B細胞分化因子
兔子D二聚體
大鼠轉化生長因子β刺激蛋白22
小鼠粘蛋白/粘液素7
大豆凝集素
小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白
兔子白介素1可溶性受體I
菜豆凝集素
人上皮細胞粘附分子
大鼠白介素32
兔鉤端螺旋體IgG
Alpha Manase(Mouse Alpha mannosidase) ELISA Kit 小鼠α甘露糖苷酶 48T
ANX- V (Mouse annexin V ) ELISA Kit 小鼠膜聯蛋白Ⅴ 48T
AECA(Mouse anti-endothelial cell antibody) ELISA Kit 小鼠抗內皮細胞抗體 48T
AlphaHBDH(Mouse Alpha-Hydroxybutyrate Dehydrogenase) ELISA Kit 小鼠α羥基丁酸脫氫酶 48T
i-PTH(Mouse intact Parathormone) ELISA Kit 小鼠全段甲狀旁腺素 48T
NE(Mouse neutrophil elastase) ELISA Kit 小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶 48T
CIAP(Mouse Calf intestinal alkaline phosphatase) ELISA Kit 小鼠牛小腸堿性磷酸酶 48T
Alpha-Gal(Mouse Alpha-galactoyl) ELISA Kit 小鼠α半乳糖基抗原 48T
Beta-Hex A(Mouse Beta-hexosaminidase A) ELISA Kit 小鼠β氨基己糖苷酶A 48T
SP-A(Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A) ELISA Kit 小鼠肺表面活性物質相關蛋白A 48T
CC16(Mouse Clara cell protein) ELISA Kit 小鼠克拉拉細胞蛋白 48T
BetaGAL(Mouse Beta-galactosidase) ELISA Kit 小鼠β半乳糖苷酶 48T
EPI(Mouse Epinephrine/Adrenaline) ELISA Kit 小鼠腎上腺素 48T
Beta Manase(Mouse Beta mannosidase) ELISA Kit 小鼠β甘露糖苷酶 48T
MPO-ANCA IgG(Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG) ELISA Kit 小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG 48T
NO(Mouse nitric oxide) ELISA Kit 小鼠一氧化氮 48T
Beta-Nph(Mouse Beta-naphthol) ELISA Kit 小鼠β萘酚 48T
C3(Mouse Complement 3) ELISA Kit 小鼠補體蛋白
