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小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞操作步驟

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時間:2017-07-27 14:56:14瀏覽次數(shù):286次

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產(chǎn)品簡介

小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞操作步驟售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

1.產(chǎn)品名稱:小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞操作步驟

2.組織來源:支氣管組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由支氣管分出的各級分枝,由支氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是,支氣管是以“C”型的支氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管平滑肌細(xì)胞主要功能:①支氣管平滑肌細(xì)胞能維持支氣管張力,保持支氣管形態(tài);②支氣管平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點和調(diào)節(jié)機制是支氣管正常生理功能的基礎(chǔ);③支氣管平滑肌通過分泌細(xì)胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì),發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。支氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

本公司的小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞采用*-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息:

DMEM[H]、FBS、平滑肌細(xì)胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

細(xì)胞名稱小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞操作步驟
規(guī)格5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
價格來電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢:
1、細(xì)胞株種類齊全,包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*,專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株,免費復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片,三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā),超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價,超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,優(yōu)秀的科研隊伍,*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
又稱:前B細(xì)胞克隆增強因子、內(nèi)肥素、腹脂素 
內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 
內(nèi)脂素/B細(xì)胞克隆增強因子 
色素上皮源性因子(多肽抗原) 
磷脂酸磷酸酶2C(抗原) 
腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白(小肽轉(zhuǎn)運蛋白)多肽 
一種腫瘤抑制基因抗原 
孕激素誘導(dǎo)阻斷因子(抗原) 
piwi 樣1蛋白(抗原) 
過氧化酶活化增生受體γ(抗原) 
蛋白磷酸酶4(抗原) 
一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因(抗原) 
RRAD(多肽抗原) 
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(抗原) 
shank1多肽抗原 
溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白家族22成員17(多肽抗原) 
可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白SLC24A5(抗原) 
溶質(zhì)攜帶物家族-1(抗原) 
鉀依賴鈉鈣交換蛋白6(抗原) 
細(xì)胞凋亡抑制因子的一種(抗原) 
核糖核蛋白抗原RO/SSA(抗原) 
干燥癥SSB/La蛋白 
Smad 2(抗原) 
相關(guān)抗原5(多肽抗原) 
肺表面活性蛋白A(抗原) 
滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1(抗體) 
非受體型*激酶(抗原) 
微管相關(guān)蛋白(抗原) 
CD90 
硫酯包含蛋白-1(抗原) 
P53誘導(dǎo)糖酵解和凋亡調(diào)節(jié)因子蛋白(抗原) 
金屬蛋白酶組織抑制因子-4(抗原) 
甲狀腺過氧化物酶(抗原) 
促甲狀腺素受體(抗原) 
淋巴細(xì)胞生成素-1(抗原) 
甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2(抗原) 
*酶(多肽抗原) 
尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運子1 (抗原) 
血管粘附蛋白1(多肽抗原) 
波形蛋白(抗原) 
 48T
ICAM-1/CD54 ELISA KIT   大鼠細(xì)胞間粘附分子1   48T
GM-CSF ELISA Kit  大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子   48T
GDNF ELISA Kit  大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子   48T
fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit  大鼠趨化因子   48T
FN ELISA Kit   大鼠纖連蛋白   48T
CNTF ELISA Kit  大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子   48T
BMPR- II ELISA Kit  大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ   48T
BMPR-1A ELISA Kit  大鼠骨成型蛋白受體1A   48T
BMP-4 ELISA Kit  大鼠骨成型蛋白4   48T
BMP-2 ELISA Kit  大鼠骨成型蛋白2   48T
HFABP ELISA Kit rat (Heartfattyacid -bindingprotein)  大鼠心臟脂肪酸結(jié)合蛋白   96T
CCK-8(Rat cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit  大鼠膽囊收縮素/縮膽囊素八肽   96T
COX-2(rat cyclooxygenase-2) ELISA KIT   大鼠環(huán)加氧酶2   96T
BDNF ELISA Kit  大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子   48T
ACV-A ELISA Kit  大鼠活化素A   48T
ANG- II ELISA Kit  大鼠血管緊張素Ⅱ   48T
ACE ELISA Kit  大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶   48T
PF/PFP(Rat Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit  大鼠穿孔素   48T
 


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