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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2017-07-31 15:22:24瀏覽次數(shù):276次
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RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞)實(shí)驗(yàn)方法售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。
細(xì)胞名稱:RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞)實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)胞形態(tài)
多角形
背景描述
生長培養(yǎng)基
MEM(貨號(hào):PM150410)+20% FBS(貨號(hào):164210-500)+1% P/S(貨號(hào):PB180120)
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
細(xì)胞名稱 | RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞)實(shí)驗(yàn)方法 |
規(guī)格 | 5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
價(jià)格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
優(yōu)勢(shì):
1、細(xì)胞株種類齊全,包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*,專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株,免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片,三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā),超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià),超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,優(yōu)秀的科研隊(duì)伍,*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
磷酸化丙酮酸脫氫酶α1抗體 phospho-PDHA1(Ser293)
3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 PDPK1
磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 Phospho-PDPK1(Tyr373 + Tyr376)
p53結(jié)合蛋白1抗體 p53BP1
磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 phospho-PKC delta (Tyr52)
磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 phospho-PKC delta (Thr505/507)
蛋白激酶C zeta 抗體 PKC zeta
嗜酸性粒細(xì)胞顆粒關(guān)鍵堿性蛋白抗體 PRG2
胰島素原抗體 Proinsulin
原蛋白轉(zhuǎn)化酶4抗體 PCSK4
細(xì)胞膜鈣ATP酶1抗體 PMCA1
磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體 PCK1
多聚合酶α抗體 PAPOA
多聚合酶g抗體 PAPOG
神經(jīng)內(nèi)分泌肽QRFP抗體 QRFP
巰基氧化酶1抗體 Quiescin Q6
喹啉酸磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶抗體 QPRT/QAPRTase
RNA結(jié)合蛋白QK1抗體 QK1
維甲酸誘導(dǎo)蛋白3抗體 RAI3
Rap*核苷酸交換因子2抗體 RAPGEF2
Rap*核苷酸交換因子(GEF)5抗體 RAPGEF5/Repac
Rho家族GTP酶2抗體 RND2/Rho7
受體輔助蛋白1抗體 REEP1
環(huán)指蛋白135抗體 RNF135
環(huán)指蛋白146抗體 RNF146
RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab5B抗體 Rab5b
胞膜間內(nèi)質(zhì)網(wǎng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體 RINT1
減數(shù)分裂同源蛋白1抗體 RMND1
RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 RASSF7
環(huán)指蛋白74抗體(重組激活基因1) RNF74
重組激活基因2蛋白抗體 RAG2
受體表達(dá)蛋白5/息肉相關(guān)蛋白抗體 REEP5
P-GP(P-glycoprotein) P-糖蛋白抗原 0.5mg
Pepsinogen C peptide *原C蛋白抗原 0.5mg
PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha) 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗原 0.5mg
PGRN (progranulin) 顆粒蛋白前體抗原 0.5mg
PHB(Prohibitin) 抑制素/腫瘤抑制因子抗原 0.5mg
PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A(多肽) 0.5mg
PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) *型纖溶酶原激活因子(多肽) 0.5mg
Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mg
Pokemon (POK Erythroid Myeloid Oogenic factor) “撲克蒙”蛋白又稱“波克曼”蛋白 0.5mg
Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 多囊腎蛋白1抗原 0.5mg
Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊腎蛋白2抗體 0.5mg
phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 磷酸化蛋白激酶B抗原(*磷酸化位點(diǎn):473) 0.5mg
RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激酶抑制蛋白抗原 0.5mg
pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(N端) 0.5mg
pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(C端) 0.5mg
PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3) *羥化酶(多肽) 0.5mg
ADAMTS-7(a disiegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬基質(zhì)蛋白酶(抗原) 0.5mg
Adiponectin 脂聯(lián)素(多肽片斷抗原)
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