NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]（小鼠成纖維細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。
細(xì)胞名稱：NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]（小鼠成纖維細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
背景描述
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]細(xì)胞是1948年3月建立的細(xì)胞系L的克隆株；細(xì)胞系L是zui早建立的連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系之一，而NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]是zui早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細(xì)胞系L，第95代的細(xì)胞系L使用毛細(xì)管法分離單細(xì)胞建立了NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]。
生長(zhǎng)培養(yǎng)基
MEM(貨號(hào):PM150410)＋10% FBS(貨號(hào):164210-500)＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]（小鼠成纖維細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]（小鼠成纖維細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]（小鼠成纖維細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
前列腺特異膜抗原抗體 PMSA
磷脂酰肌醇激酶抗體 PI3 kinase p85 alpha subunit
胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體 PLGF
蛋白激酶A抗體 PKA alpha + beta
蛋白激酶C beta 1/2抗體 PKC beta 1 + 2
胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體 PLGF
胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體 PLGF
外周髓鞘蛋白-22抗體 PMP22
平足蛋白抗體(淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白) Podoplanin
蛋白磷酸酯酶-1B抗體 PP-1B
蛋白質(zhì)磷酸酶-2A抗體 PP2A alpha + beta
磷酸酯酶-2Ac抗體 PPP4C
磷酸化-絲裂原活化蛋白激酶p38抗體（P-p38 MAPK） Phospho-P38 MAPK (Thr180 + Tyr182)
D型-過(guò)氧化酶活化增生受體抗體 PPAR delta + beta
過(guò)氧化酶活化增生受體γ抗體（PPARγ） PPAR gamma
孕激素受體抗體 progesterone receptor
*羥化酶抗體 PHD3
早老素蛋白-1抗體 presenilin 1
早老素蛋白-1抗體 presenilin 1
早老素蛋白-1抗體 presenilin 1
前列腺干細(xì)胞抗原抗體 PSCA
突觸后密度蛋白95抗體 PSD95
P選擇素抗體 P-selectin/CD62p
一種腫瘤抑制基因抗體（N端） PTEN
腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPK α 1抗體 AMPK alpha-1
*依賴的蛋白C重鏈抗體 protein C
神經(jīng)叢蛋白A1抗體 Plexin A1
p21激活激酶4抗體 PAK4
磷酸化p21激活激酶4/5/6抗體 Phospho-PAK4(Ser474) + PAK5(Ser602) + PAK6(Ser560)
磷酸化p21激活激酶1/2抗體 Phospho-PAK1(Ser199 + Ser204) + PAK2 (Ser192 + Ser197)
HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原 0.5mg
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]（小鼠成纖維細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原 0.5mg
HIF-1 Beta/AR1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗原 0.5mg
HIF-2 Alpha (Hypoxia-inducible factor-2 Alpha) 缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗原 0.5mg
Histone H1b(Histone H1.4) 組蛋白H1b抗原 0.5mg
HDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 組織蛋白去乙酰化酶1抗原 0.5mg
Flag-Tag (CT) Flag Tag標(biāo)簽多肽 1mg
DYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標(biāo)簽DYKDDDDK Tag分支肽 0.5mg
T7 tag(recombina T7-tagged proteins) T7 tag標(biāo)簽抗原 0.5mg
V5 tag(recombina V5-tagged protein) V5 tag多肽抗原 0.5mg
KT3 tag KT3 tag標(biāo)簽抗原 0.5mg
VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag標(biāo)簽抗原 0.5mg
HLA-DR(human leukoyte Aigen DR) HLA-DR抗原 0.5mg
HLA-E (Human Leukocyte Ai-gen-E) 人類白細(xì)胞抗原E 0.5mg
Ai-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷移率族蛋白A1抗原 0.5mg
HMGA2 (high mobility group A2) 高遷移率族蛋白A2抗原 0.5mg
HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原 0.5mg
HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原 0.5mg
HO-2(Heme oxygenase 2) 血紅素氧合酶-2抗原 0.5mg
phospho-HP1/heterochromatin protein 1 (pTyr24)(fruit fly) 異染色質(zhì)蛋白1(磷酸化多肽) 0.5mg
phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)peptide 異染色質(zhì)蛋白1（磷酸化多肽）
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