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PED（豬內(nèi)皮細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間：2017-08-01 15:55:01瀏覽次數(shù)：286次

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PED（豬內(nèi)皮細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱:PED（豬內(nèi)皮細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

背景描述

生長(zhǎng)培養(yǎng)基

DMEM高糖(貨號(hào):PM150210)＋10% FBS(貨號(hào):164210-500)＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞名稱	PED（豬內(nèi)皮細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法
規(guī)格	5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
價(jià)格	來(lái)電可享受優(yōu)惠

優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
磷酸化組蛋白H3抗體 Phospho-Histone H3 (Thr3)
組蛋白去乙酰化酶5抗體 HDAC5
A型流感病毒H5N1凝集素 H5N1 Hemagglutinin
人巨細(xì)胞病毒UL49蛋白抗體 HCMV UL49
肝細(xì)胞核因子1β/HNF-1β抗體 HNF1 beta
HHLA3蛋白抗體 HHLA3
HHIP樣蛋白2抗體 HHIPL2
A型流感病毒H3N2-M2蛋白抗體 H3N2 Matrix Protein 2
HSH2D抗體 HSH2D
水蛭素抗體 Hirudin
白細(xì)胞抗原A抗體 HLA Class 1 ABC
人瘤病毒16型E7抗體 HPV16 E7
人類狀瘤病毒58 E6蛋白抗體 HPV58 E6
人類狀瘤病毒16抗體 HPV16 E6 protein
人類狀瘤病毒18 E7抗體 HPV18 E7
人類狀瘤病毒31 E7抗體 HPV31 E7
轉(zhuǎn)錄因子HES2抗體 HES2
轉(zhuǎn)錄因子HES3抗體 HES3
多磷酸肌醇激酶IPMK抗體 IPMK
IKK復(fù)合物相關(guān)蛋白抗體 IKAP
IQSEC2抗體 IQSEC2
交叉蛋白2抗體 Intersectin 2
三磷酸*焦磷酸酶抗體 Inosine triphosphate pyrophosphatase
吲哚胺2,3-雙加氧酶抗體 IDO
白細(xì)胞介素19抗體 IL-19
抑制素A/Inhibin α抗體 Inhibin Alpha
胰島素基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1/2抗體 Islet-1+2
磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 Phospho-IRAK1 (Ser376)
磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 Phospho-IRAK1 (Thr209)
磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 Phospho-IRAK1 (Thr387)
干擾素調(diào)節(jié)因子3 IRF3
）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-ULBP3/N2DL3/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白3抗體IgG 植物硫氰酸酶（rhodanase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-UMOD/FITC 熒光素標(biāo)記UMOD蛋白抗體IgG 酒類乙醛比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgG 飲料乙醛比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體C端IgG 果菜乙醛比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-USF-1/FITC 熒光素標(biāo)記上游刺激因子1抗體IgG 酒類乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-VAMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體IgG 飲料乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-VAMP-2/FITC 熒光素標(biāo)記囊泡相關(guān)膜蛋白2抗體IgG 調(diào)料乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-VAMP-3/FITC 熒光素標(biāo)記囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體IgG 烘賠食品乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-VAP1/FITC 熒光素標(biāo)記血管粘附蛋白1抗體IgG 乳品乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
ai-VASH1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗血管抑制蛋白1抗體IgG 蔬菜乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-VAT/FITC 熒光素標(biāo)記囊泡乙酰*通道抗體IgG 肉類乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-USP1/FITC 熒光素標(biāo)記泛素特異性蛋白酶1抗體IgG 藥品乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-VASP/FITC 熒光素標(biāo)記血管擴(kuò)張刺激磷蛋白抗體IgG 飼料乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-VCAM-1/FITC(CD106) 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體IgG 生物樣品乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-VCAM-1/CD106 /FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體IgG 乙酸待測(cè)樣品處理試劑盒 0.2ml
Ai-Vcan/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白聚糖Versican抗體IgG 酒類乙酸激酶法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-V.cholera Ogawa/FITC 熒光素標(biāo)記01群稻葉型霍