 |
上海科順生物科技有限公司
主營產品： elisa,生物試劑,標準品,抗體 |
|
上海科順生物科技有限公司
主營產品： elisa,生物試劑,標準品,抗體 |
2019-6-4 閱讀(180)
中文名：小鼠ELISA試劑盒
英文名：Mouse ELISA Kit
供應商:科順生物
規格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6個月
標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
使用范圍：僅供科研使用,不得用于臨床。
用途：用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中的含量或活性。
性能：敏感性高，特異性強，重復性。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。
小鼠ELISA試劑盒基本原理：
①抗原或抗體能吸附到固相載體表面，并保持其免疫學活性；
②抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，仍保持其免疫學和酶學活性；
③酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
小鼠ELISA試劑盒標本的采集及保存：
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 細胞培養物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響zui后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
小鼠ELISA檢測試劑盒說明書樣品收集、處理方法：
1、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心
2、血漿-----應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心
3、細胞培養上清---檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清
4、組織標本-----切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用
5、培養細胞----- 檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
小鼠ELISA檢測試劑盒操作步驟：
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10 孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉，再各取50μl 分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為120 U/L ，80 U/L，40 U/L，20 U/L，10 U/L）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30（48T 的20 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T 的20 倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止
液后15 分鐘以內進行。
小鼠ELISA試劑盒注意事項：
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3． 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
4. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
9.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
ELISA試劑盒，小鼠ELISA檢測試劑盒說明書性能：
1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于（參考說明書）
3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6個月。
小鼠ELISA檢測試劑盒相關產品：
KS16697 犬透明質酸(HA)ELISA試劑盒
KS16698 犬特殊基團成分(*結合蛋白)(GC)ELISA試劑盒
KS16699 犬髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
KS16700 犬髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
KS16701 犬松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒
KS16702 犬水通道蛋白5(AQP5)ELISA試劑盒
KS16703 犬*結合蛋白4(RBP4)ELISA試劑盒
KS16704 犬*(SS)ELISA試劑盒
KS16705 犬生長激素(GH)ELISA試劑盒
KS16706 犬腎損傷分子1(Kim1)ELISA試劑盒
KS16707 犬腎素(REN)ELISA試劑盒
KS16708 犬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒
KS16709 犬神經型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA試劑盒
KS16710 犬軟骨寡聚基質蛋白(COMP)ELISA試劑盒
KS16711 犬乳鐵傳遞蛋白(LTF)ELISA試劑盒
KS16712 犬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)ELISA試劑盒
KS16713 犬熱休克蛋白70(HSP70)ELISA試劑盒
KS16714 犬醛固酮(ALD)ELISA試劑盒
KS16715 犬前列腺酸性磷酸酶(ACP3)ELISA試劑盒
KS16716 犬前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒
KS16717 犬前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒
KS16718 犬前白蛋白(PA)ELISA試劑盒
KS16719 犬葡萄糖6磷酸酶(G6PC)ELISA試劑盒
KS16720 犬皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒
KS16721 犬*(Cortisol)ELISA試劑盒
KS16722 犬*抗*復合物(TAT)ELISA試劑盒
KS16723 犬凝聚素(CLU)ELISA試劑盒
KS16724 犬內皮型一氧化氮合成酶(NOS3)ELISA試劑盒
KS16725 犬內皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒
KS16726 犬內毒素(ET)ELISA試劑盒
KS16727 犬腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒
KS16728 犬腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒
KS16729 犬繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒
KS16730 犬免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒
KS16731 犬免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA試劑盒
KS16732 犬免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
