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正常驢血清:如何選擇效果好的封閉血清

時間:2018/6/7閱讀:225
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   2017年12月份,我們為您分享了Abbkine全新上線的封閉血清產品線  一經上市,便倍受廣大客戶的青睞,Abbkine封閉血清以其的產品力,幫助大量客戶簡化實驗操作,優化實驗結果。我們非常高興在這短短的4個月里,Abbkine的正常驢血清(Normal Donkey Serum, BMS0140)便已發表了兩篇文章,相信后面的文章會雨后春筍般涌現:

 

  •        Bone marrow mesenchymal stem cells protect against n-hexane-induced neuropathy through beclin 1-independent inhibition of autophagy

       Hao J, Li S, Shi X, et al. Sci Rep, 2018, 8(1): 4516.

 

 

 

  •        2,5-Hexanedione induces autophagic death of VSC41 cells via a PI3K/Akt/mTOR pathway

       Guan H, Piao H, Qian Z et al. Mol Biosyst.

 

 

         Abbkine為您提供非常好用的驢封閉血清,用了都說好:  

產品貨號產品英文名稱產品中文名稱
BMS0140Normal Donkey Serum正常驢血清

 

    為什么需要封閉?

     封閉步驟可減少一抗和二抗與非靶標位點進行非特異性結合時所產生的本底信號。理想情況是,封閉劑將占據樣本中的“黏性”位點,比如暴露的帶電性或疏水性蛋白表面,同時不會干擾一抗/二抗識別靶表位,從而盡可能提高信噪比(S/N)。

 

       用封閉血清效果好嗎?

封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實驗中樣本的封閉。可以封閉待檢樣本中與蛋白質非特異性結合的位點,另外還可以封閉樣品中內源性的Fc片段結合位點,阻斷抗體與樣品中的Fc受體結合,從而降低背景,減少假陽性。對于適用多抗的實驗,二抗種屬來源的正常血清是封閉處理的金標準。

 

       封閉血清如何使用?

推薦用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍,配成5%-20%的工作液,直接滴加在組織切片或者細胞涂片上,37℃度孵育10-30分鐘(或者室溫1h),清除血清,勿洗,滴加適當比例稀釋的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃過夜。

 

       實用Tips

  1. 1.佳的稀釋比例需研究者通過實驗來確定。建議的起始稀釋比例如下:IHC-p(1:10-20);IF / ICC(1:10-20);ELISA(1:100)。
  2. 2.封閉用血清中不能含有目標蛋白,且與一抗來源不同,可用與二抗相同來源的封閉血清。
  3. 3.封閉結束后,用濾紙吸去血清,不洗,直接滴加一抗。
  4. 4.每張切片需要量,可以參考50ul PBS + 5ul 血清 來計算。
  5. 5.如何如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損:

 

       將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。長時間儲存在2~8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。如果開蓋后未使用完,我們建議存放于4℃,但請勿超過一個月。

 

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