慢病毒滴度檢測是檢驗慢病毒是否合格的方法之一。在一些特定的實驗中,我們需要為病毒的濃度,即滴度,進行測定。由于慢病毒載體的不同以及客戶需求的不同,有的慢病毒會帶有熒光標記,而有的沒有,故而滴度檢測也有不同的方法。
一、ELISA法
傳統的p24 ELISA可檢測到293細胞在瞬時轉染過程中產生的病毒相關p24和游離p24,而游離的p24可以占上清液中p24總量的很大一部分。因此,傳統的p24 ELISA通常會高估存在的慢病毒的數量。
新的QuickTiter慢病毒滴度試劑盒(與慢病毒相關的HIV p24)可zui大程度地減少此問題。一項專有技術可在運行測定的ELISA部分之前,將慢病毒與溶液中的游離p24分離。
二、Real-time PCR法
GeneCopoeia的Lenti-Pac 慢病毒滴度檢測試劑盒系列產品為簡便、快速檢測慢病毒顆粒的滴度而設計。試劑盒包含從RNA抽提到qRT- PCR檢測過程的全套試劑,樣品經過RNA抽提、DNase消化、反轉錄、qRT-PCR步驟即可確定慢病毒滴度。
特點:
1.能夠判斷慢病毒是否包裝成功;
2.準確測定病毒拷貝數,以確保細胞轉導和基因表達的效率;
3.提供滴度檢測過程從病毒的RNA提取到qPCR檢測所需要的試劑。
綜上,慢病毒滴度檢測:ELISA法結合qPCR法,想怎么測就怎么測~
文章來源:艾美捷科技
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