褪黑素（Melatonin，MT）是一種主要由松果體在夜間釋放的激素，長期以來一直與睡眠-覺醒周期的控制有關。褪黑素屬于吲哚雜環類化合物，又稱為松果體素、褪黑激素、褪黑色素。褪黑素合成后，儲存在松果體內，交感神經興奮支配松果體細胞釋放褪黑素。褪黑素的分泌具有明顯的晝夜節律，白天分泌受抑制，晚上分泌活躍。

Abbexa褪黑素（Melatonin，MT）ELISA試劑盒助力褪黑素研究：

試劑準備：

1） 標準：用推薦的標準稀釋液量配制標準溶液，制成標準溶液。然后使用標準稀釋液緩沖液，按照協議的指示對標準溶液進行串行稀釋。

2） 洗滌緩沖液：按照協議的規定，用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液。

3） 檢測試劑制備：計算所需工作液的總體積。用稀釋劑A和稀釋劑B分別在1:100稀釋檢測試劑A和檢測試劑B。

分析程序：

1） 設置標準、測試樣品和控制井。

2） 等分50µl將稀釋標準液注入標準井。

3） 等分50µl標準稀釋液緩沖液注入對照（零）孔。

4） 等分50µl將稀釋樣品注入樣品孔。

5） 立即等分50µ每口井注入1升檢測試劑A。37℃孵育1小時°C

6） 洗3次。

7） 等分100µ每口井注入1升檢測試劑B。37℃孵育30分鐘°C

8） 洗5次。

9） 等分90µ每口井的TMB基板數量。37℃孵育10-20分鐘°C

10）等分50µ我要停止解決問題。

11）在450牛米處測量外徑。

褪黑素（MT）ELISA試劑盒（#abx354613）檢測原理：

該試劑盒基于競爭性酶聯免疫吸附測定技術。抗體被預先包被在96孔板上。將標準品、測試樣品和生物素結合試劑添加到孔中并孵育。生物素標記的MT與未標記的MT之間發生競爭抑制反應。然后加入HRP結合試劑，并孵育整個培養皿。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的結合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應。加入TMB基質后，只有含有足夠MT的孔才會產生藍色產物，然后在加入酸性停止溶液后變為黃色。黃色的強度與鍍液中MT的結合量成反比。用分光光度法在450 nm的微孔板讀卡器中測量OD，由此可計算MT的濃度。

結果計算：

此分析具有競爭性，因此樣品中的MT濃度與測量的吸光度呈負相關。用標準濃度（y軸）和測量的平均吸光度（x軸）的對數創建一個圖表。通過標準點應用*擬合趨勢線。樣品的MT濃度可以從標準曲線中插值。

艾美捷小貼士：

僅供研究使用。范圍和靈敏度可能會發生變化。隨時關注zui新信息。為了獲得準確結果，必須將樣品濃度稀釋至試劑盒的中量程。