今天我們就主要來聊一聊小G蛋白活性增強劑——鳥苷酸交換因子(GEF)，GEF 是通過催化其目標 GTPase上的核苷酸交換來發揮作用，GEF與核苷酸結合的 GTPase 結合，這會導致結合的核苷酸被釋放，從而產生不含核苷酸的GEF-GTPase 反應中間體。這種不含核苷酸的復合物隨后將結合新的核苷酸，然后GEF再從GTPase 中釋放出來。
由于GEFs對GDP-GTPases的親和力高于對相應GTP-GTPases的親和力，在正常細胞中GTP和GDP比率約為10:1，GEFs將推動從GDP-GTPases到GTP-GTPases的轉換。
艾美捷GEF活性檢測試劑盒是一款基于熒光法的檢測GTP酶上的核苷酸轉換的試劑盒，可適用于常規的96孔格式或高通量384孔格式。
GEF活性檢測試劑盒包含檢測所需的所有試劑：
1.Exchange Buffer
2.His標簽 Cdc42蛋白
3.His標簽 Rac1 蛋白
4.His標簽 RhoA 蛋白
5.His標簽 hDbs 蛋白(作為 Cdc42 和 RhoA 的GEF的陽性對照 )
6.黑色384孔板
7.黑色96孔板
檢測原理：該試劑盒是通過檢測熒光核苷酸類似物 N-甲基鄰氨基苯甲酰-GTP(mant-GTP)對 GTPase 的結合情況來檢測GEF的活性的。一旦mant-GTP與 GTPase 結合， mant-GTP的熒光強度(Ex：360 nm，Em：440 nm)顯著增加，通過檢測游離的mant-GTP和GTPase 結合的 mant-GTP 之間的熒光值差異，即可檢測樣本中GEF的活性。
GEF活性檢測試劑盒的主要用途和應用:
1.測定未知GEFs活性；
2.小GTPases及其相關GEFs的生化特性表征；
3.研究不同輔助因子或蛋白結構域對GEF活性的調控；
4.篩選GEFs或GTPases突變蛋白的活性和底物特異性；
5.HTS(高通量篩選)篩選鑒定GEF抑制劑。
檢測結果展示：
圖 1. 96 孔板中Dbs 對于Cdc42、RhoA 和 Rac1 的交換活性
圖 2.384 孔板中Dbs 對于Cdc42、RhoA 和 Rac1 的交換活性
Cytoskeleton專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發與生產。公司提供藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾(PTM)、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產品，尤其以細胞骨架相關研究見長，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規模篩選研究和高通量大規模篩選研究。艾美捷科技是Cytoskeleton的中國代理商，為您提供優質的GEF活性檢測試劑盒。
