通過病毒載體傳遞基因的一個特殊挑戰(zhàn)是病毒滴度的準(zhǔn)確測量。傳統(tǒng)上，腺相關(guān)病毒(adeno-associatedvirus，AAV)顆粒是通過DNA斑點(diǎn)印跡或類似方法測量的。這些方法非常耗時，并且存在高度的測定間變異性。對于高度純化的病毒樣本，260nm處的吸光度已用于估計(jì)病毒顆粒的總數(shù)。然而，這種方法不能用于未純化的病毒上清液，因?yàn)樗钠渌煞謺?dǎo)致260nm的吸光度。通過使用僅與AAV完整顆粒反應(yīng)的抗體開發(fā)了一種ELISA方法；然而，這種方法測量所有AAV顆粒，包括那些缺乏基因組DNA的顆粒。
眾多高分文章引用的，適用于任何血清型的純化AAV，以及未純化的AAV-2和AAV-DJ型腺相關(guān)病毒(AAV)滴度檢測試劑盒來助力。
艾美捷 腺相關(guān)病毒(AAV)滴度檢測試劑盒組分：
1.ViraBind AAV Reagent A
2.ViraBind AAV Reagent B
3.QuickTiter AAV Capture Matrix
4.QuickTiter AAV Wash Solution (5X)
5.QuickTiter Solution C (10X)
6.CyQuant GR Dye (400X)
7.QuickTiter AAV DNA Standard
實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢：
1.簡單快捷：未純化的上清液大約需要 4 小時，對于純化的 AAV 大約需要 30 分鐘；
2.樣本適用：檢測任何血清型的純化AAV，以及未純化的AAV-2和AAV-DJ型
3.靈敏度：可檢測1X109GC/ml的AAV的細(xì)胞上清；檢測5X1010GC/ml的純化的AAV。
原理：
標(biāo)曲：
部分近期發(fā)表文章：
1.Francisco, J. et al. (2021). AAV-mediated YAP expression in cardiac fibroblasts promotes inflammation and increases fibrosis. Sci Rep. 11(1):10553. doi: 10.1038/s41598-021-89989-5.
2.Kwon, O.C. et al. (2021). SGK1 inhibition in glia ameliorates pathologies and symptoms in Parkinson disease animal models. EMBO Mol Med. doi: 10.15252/emmm.202013076.
3.Lebeau, P.F. et al. (2020). The loss-of-function PCSK9Q152H variant increases ER chaperones GRP78 and GRP94 and protects against liver injury. J Clin Invest. doi: 10.1172/JCI128650.
4.Kawaguchi, Y. et al. (2020). Endoplasmic reticulum chaperone BiP/GRP78 knockdown leads to autophagy and cell death of arginine vasopressin neurons in mice. Sci Rep. 10(1):19730. doi: 10.1038/s41598-020-76839-z.
5.Rai, R. et al. (2020). Targeted gene correction of human hematopoietic stem cells for the treatment of Wiskott - Aldrich Syndrome. Nat Commun. 11(1):4034. doi: 10.1038/s41467-020-17626-2.
6.Zeng, J. et al (2020). The Zika Virus Capsid Disrupts Corticogenesis by Suppressing Dicer Activity and miRNA Biogenesis. Cell Stem Cell. S1934-5909(20)30350-7. doi: 10.1016/j.stem.2020.07.012.
Cell Biolabs產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。艾美捷科技是Cell Biolabs的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的腺相關(guān)病毒(AAV)滴度檢測試劑盒。
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