目前脂類染色使用zui廣泛的染料是蘇丹染料,zui常用的有蘇丹Ⅲ,蘇丹Ⅳ,蘇丹黑及油紅O等,這種脂肪染色方法,實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現染料的顏色的過程,經研究認為組織中脂質在液態或半液態時,對蘇丹染料著色效果非常棒,根據這一原理,適當提高溫度(37℃-60℃)會對組織切片產生較好的染色效果。
蘇丹染料主要針對于組織切片的脂質染色,同時靈敏度也較低,且存在操作過程中試劑揮發過多,易形成背景沉淀,無法兼容活細胞等局限。
鑒于脂質化學染料有上述諸多弊端,今天給大家介紹一下尼羅紅這種比較實用的脂質熒光染料。
尼羅紅(也被稱為尼羅藍惡嗪酮)是一種親脂性染料,它對環境非常敏感。尼羅紅在脂質豐富的環境中具有強烈的熒光,在以水為介質的環境中,其熒光強度非常弱。它是非常好的活體染料,通過熒光顯微鏡和流式細胞術來檢測細胞內脂質。尼羅紅將細胞內脂質體染成紅色。它對細胞質中的脂質體具有更好的選擇性,在細胞中看見的是金黃色熒光(450-500 nm 激發; >528 nm發射)而不是紅色熒光(515-560 nm激發; >590 nm 發射)。這是一種很強的熒光,但是只有在疏水性環境中。
艾美捷 尼羅紅(cat#22190)染色結果賞析:
尼羅紅染色IAA處理的褐藻(黃色是葉綠體,紅色是脂滴)
引文:Indole-3-acetic-acid-induced phenotypic plasticity in Desmodesmus algae by Chung et al., Scientific Reports, July 2018.
除了廣泛使用的尼羅紅,升級版脂質染色工具: Nile Green和Droplite Red 跟尼羅紅性質類似,它們也是在富含脂質的環境中具有強烈熒光的,而在水性介質中具有zui小的熒光。可用熒光顯微鏡,流式細胞術或熒光微孔板閱讀器檢測細胞內脂液滴,是一類優異的活細胞脂質染料。 其中Nile Green僅染色細胞內脂液滴,具有綠色熒光,它可以與其他熒光染料一起使用,用于多重染色,彌補了尼羅紅染色的缺陷。
AAT Bioquest Inc。是一家為從事生命科學研究、診斷研發及藥物開發的科學家研發、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域,包括顯色、熒光和生物發光技術。艾美捷科技是AAT 的中國代理商,為您提供優質的尼羅紅。