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RBOHD |呼吸爆發氧化酶同源蛋白D應用案例來啦

時間:2021/9/1閱讀:72
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  RBOHD(呼吸爆發氧化酶同源蛋白D)是一種鈣依賴性NADPH氧化酶,可產生超氧化物。參與與病原體不相容相互作用期間活性氧物種(ROS)的產生以及UV-B和脫落酸ROS依賴性信號傳導。
 
  艾美捷 RBOHD |呼吸爆發氧化酶同源蛋白D應用案例:
 
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  從Col-0(野生型)和rbohd空突變體(Nühse et al.,2007)的10或12株7日齡擬南芥幼苗中分離出總蛋白。16µl總蛋白在65°C下變性5分鐘,在8%SDS-PAGE上分離。并在55V電壓下使用槽式傳輸系統傳輸70分鐘至硝化纖維素膜。用1xPBS+0.1%吐溫20+5%牛奶(PBS-T)或TBS+0.1%吐溫20(TBS-T)+5%牛奶在室溫(RT)下攪拌2小時阻斷印跡。一級抗體按指示分別稀釋至1:2500和1:5000,并在4℃下在1xPBS-T pr TBS-T+5%牛奶中攪拌培養。傾析一級抗體溶液,在RT條件下攪拌,在1xPBS-T或TBS-T中洗滌印跡3次(每次7分鐘)。根據制造商的建議,將二級抗體山羊抗兔HRP結合物(AS09 602,Agrisera)稀釋至1:20000,并使用化學發光檢測試劑對印跡進行培養。X射線膠片的曝光時間為2分鐘。作為同一膜的對照部分,用抗CNX1/2抗體(AS12 2365,Agrisera)孵育。
 
  RBOHD丨呼吸爆發氧化酶同源蛋白D相關研究工具介紹:
 
  1、針對參與氧化應激的蛋白質的抗體的收集
 
  2、植物蛋白提取緩沖液
 
  3、二級抗體
 
  參考資料:
 
  Nühse等人。質膜蛋白的定量磷酸化蛋白質組分析揭示了植物天然免疫應答的調節機制。植物J。2007年9月;51(5): 931–940.
 
  Nga Nguyen、Kelly Mason和Antje Heese(密蘇里大學-哥倫比亞大學,密蘇里州,美國)提供
 
  Agrisera公司提供的植物領域的抗體涵蓋擬南芥、萊茵衣藻、藍藻、松柏類、硅藻、大豆、大麥、蒺藜苜蓿、煙草、稻、菜豆、小立碗蘚、楊樹、豌豆、番茄、馬鈴薯、菠菜、小麥、玉米、葡萄等多個物種。艾美捷科技是Agrisera的中國代理商,為科研工作者提供優質的RBOHD丨呼吸爆發氧化酶同源蛋白D。
 

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