關(guān)于SAM甲基轉(zhuǎn)移酶：

關(guān)鍵生物分子和蛋白質(zhì)的甲基化在許多生物系統(tǒng)中發(fā)揮著重要作用，包括信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、生物合成、蛋白質(zhì)修復(fù)、基因沉默和染色質(zhì)調(diào)節(jié) (1)。

SAM依賴(lài)性甲基轉(zhuǎn)移酶使用 SAM，它是僅次于 ATP 的第二個(gè)J常用的酶輔助因子。SAM，也稱(chēng)為 AdoMet，充當(dāng)修飾蛋白質(zhì)和 DNA 所需的甲基的供體。SAM 的異常水平與許多異常有關(guān)，包括阿爾茨海默氏癥、抑郁癥、帕金森氏癥、多發(fā)性硬化癥、肝功能衰竭和癌癥 (2)。

艾美捷 G-Biosciences 的 SAM 甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定是連續(xù)的酶偶聯(lián)測(cè)定，可以連續(xù)監(jiān)測(cè) SAM 依賴(lài)性甲基轉(zhuǎn)移酶 (3)，而無(wú)需使用放射性標(biāo)記或終點(diǎn)測(cè)量。一種敏感的、基于紫外線的、SAM265, 和比色法,SAM510, 提供 SAM 甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)。這熒光的SAM fluoro：SAM 甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)也可用。

艾美捷G-Biosciences SAM510™: SAM 甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定是一種連續(xù)動(dòng)力學(xué)酶偶聯(lián)測(cè)定，可以連續(xù)監(jiān)測(cè)純化的 SAM 依賴(lài)性甲基轉(zhuǎn)移酶，而無(wú)需使用放射性標(biāo)記或終點(diǎn)測(cè)量。這是一種用于蛋白質(zhì) SAM 甲基轉(zhuǎn)移酶的靈敏酶聯(lián)測(cè)定法。

關(guān)鍵生物分子和蛋白質(zhì)的甲基化在許多生物系統(tǒng)中發(fā)揮著重要作用，包括信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、生物合成、蛋白質(zhì)修復(fù)、基因沉默和染色質(zhì)調(diào)節(jié)。

SAM依賴(lài)性甲基轉(zhuǎn)移酶使用 SAM，它是僅次于 ATP 的第二個(gè)極常用的酶輔助因子。SAM，也稱(chēng)為 AdoMet，充當(dāng)修飾蛋白質(zhì)和 DNA 所需的甲基的供體。SAM 的異常水平與許多異常有關(guān)，包括阿爾茨海默氏癥、抑郁癥、帕金森氏癥、多發(fā)性硬化癥、肝功能衰竭和癌癥。

基本上，從 SAM 中去除甲基會(huì)產(chǎn)生 S-腺苷高半胱丨氨酸，其通過(guò)所包含的腺苷高半胱丨氨酸核苷酶迅速轉(zhuǎn)化為 S-核糖高半胱丨氨酸和腺嘌呤。這種快速轉(zhuǎn)化防止了腺苷同型半胱丨氨酸的積累及其對(duì)甲基化反應(yīng)的反饋抑制。最后，腺嘌呤通過(guò)腺嘌呤脫氨酶轉(zhuǎn)化為次黃丨嘌呤，然后再轉(zhuǎn)化為尿酸鹽和過(guò)氧化氫。過(guò)氧化氫的產(chǎn)生速率用比色測(cè)定法通過(guò)在 510nm 處吸光度的增加來(lái)測(cè)量。

由于腺苷高半胱丨氨酸核苷酶的特異性，該測(cè)定可適用于任何純化的 SAM 依賴(lài)性甲基轉(zhuǎn)移酶或產(chǎn)生 5-腺苷高半胱丨氨酸或 5'-甲基硫腺苷的純化酶。該試劑盒提供了足夠用于 100 x 115µl 微孔檢測(cè)的試劑。

艾美捷G-Biosciences SAM510™: SAM 甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定特征：

純化甲基轉(zhuǎn)移酶的動(dòng)力學(xué)分析或篩選甲基化抑制劑。

用于動(dòng)力學(xué)研究的連續(xù)酶偶聯(lián)測(cè)定。

比色、非放射性測(cè)定。

隨附所有試劑，包括陽(yáng)性對(duì)照。

適用于產(chǎn)生 S-腺苷高半胱丨氨酸或 5'-甲基硫腺苷的酶。

艾美捷G-Biosciences SAM510™: SAM 甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定應(yīng)用：

用于蛋白質(zhì) SAM 甲基轉(zhuǎn)移酶的動(dòng)力學(xué)分析。

篩選甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的理想選擇。

參考文獻(xiàn)：

1. Cheng, X. & Blumenthal, R.M. (1999) S-Adenosylmethionine Dependent Methyltransferases World Scientific, Singapore.

2. Schubert, H.L. et al. (2003) Trends Biochem. Sci 28: 329-335.

3. Dorgan, K.M. et al. (2006) Anal. Biochem. 350:249-255.

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