艾美捷 Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold 特點：

1.10 nm Ni-NTA-Nanogold®新的！直接 EM viualization 的最佳尺寸 用于嵌入后標記

2.5 nm Ni-NTA-Nanogold®直接進入EM -無需銀/金增強！

3.1.8 nm Ni-NTA-Nanogold®非常適合冷凍電鏡：最小的探頭：最佳穿透力和最高分辨率

Ni-NTA-Nanogold ®設計用于使用電子顯微鏡、光學顯微鏡或印跡檢測或定位多zu氨酸 (his) 標記的融合蛋白。

Ni-NTA-Nanogold ®包含一個 1.8 nm 或 5 nm Nanogold® 顆粒，其中多個鎳-次氮基三乙酸官能團結合到金顆粒表面的配體中。鎳-次氮基三乙酸官能團與標記蛋白中的zu氨酸結合，并形成具有J低解離常數的穩定復合物。

使用Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold ®，可以在非變性或變性條件下標記源自多種表達載體中的任何一種的帶his標簽的融合蛋白。當與金或銀增強試劑（例如GoldEnhance™或HQ Silver）一起使用時，可以通過顯微鏡或印跡觀察標記的帶 hist 標簽的融合蛋白。

10 nm Ni-NTA-Nanogold®——無需銀或金增強，同時保留原始 1.8 nm 和 5 nm 探頭的高分辨率。

整個探針的大小與未標記的 IgG 分子相似，但較大的金顆粒可以在沒有銀或金增強的標準 TEM 下清晰可見，即使在較寬的視圖中，例如厚切片和整個細胞。由于較大的金，印跡靈敏度將比較小的尺寸更高。

1.高可見度：10 nm 金顆粒高度單分散，在大多數沒有銀或金增強的樣品中，在 TEM 分辨率下清晰可見。

2.用于標記任何帶 His 標簽的融合蛋白的通用探針：這簡化了標記，因為它可用于標記許多不同的靶標，而無需生成不同的抗體。它還可以與不同尺寸的金顆粒或銀或金增強的 Nanogold ®一起用于多種標記研究。

3.較精確的標記分辨率：次氮基三乙酸 - Ni(II) 螯合物與金表面之間的聯系比抗體或蛋白質小得多，因此結合的金更靠近其目標：我們估計與金顆粒表面的距離His 標簽的長度約為 2 nm。另外，這是一個初級探針：沒有二級抗體來增加與目標的距離。使用 NTA-Ni(II)-Nanogold ®以分子分辨率定位蛋白質復合物或其他大分子組裝體中的位點。

4.高溶解性、生物相容性和穩定性：10 nm Ni-NTA-Nanogold ®是使用穩定、高度親水的表面功能化制備的。

5.強結合：Ni(II)-NTA 的結合常數非常高，這是由于多個zu氨酸結合的螯合效應和多個 Ni(II)-NTA 功能的靶結合的結合。解離常數估計在10 -7到10 -13 M -1之間。對于許多應用，這提供了與抗體相當的結合強度。

6.高穿透性：10 nm Ni-NTA-Gold 的大小與未標記的抗體 IgG 分子相似，并且比 10 nm 膠體金-抗體偶聯物小得多。因此，它可以比 10 nm 免疫金探針更好地滲透到樣本中并進入空間受限的內部位點，而無需額外的未標記初級質量，并提供更高的標記密度。在某些系統中，它可以用于更強的固定或更少的透化，從而使標記具有更好的超微結構保存。

7.超高靈敏度：當用于檢測印跡上帶有 His 標簽的目標時，較大的金顆粒提供最高的靈敏度，幾乎沒有背景。

上圖：NTA-Ni(II)-5 / 10 nm Nanogold ®的結構，顯示了摻入的金屬螯合物與帶 His 標簽的蛋白質的結合。從金顆粒表面到 His 標簽的距離估計為 1.5 nm。上圖：5 nm NTA Nanogold的透射電子顯微照片：平均直徑 5.11±0.84nm。

艾美捷 Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold ®探針的應用：

1.以納米精度闡明蛋白質結構的混合方法：

由 Wei-hau Chang 博士小組開發(Chang, 2013)

1）在 cryo-EM 中同時使用 1.8 nm 和 5 nm Ni-NTA-Nanogold® 以獲得更好的單粒子分析

2）結合 FRET 進一步完善您的蛋白質圖譜并觀察相互作用過程中的構象/位置變化

2.用于 EM 的鎳染色 His-tags：對含有重組 His-tagged 蛋白質的蛋白質、蛋白質復合物或細胞器進行高分辨率標記，用于 TEM 或 STEM 定位。

3.組織切片中帶His標簽的蛋白質的“通用"預嵌入標記，用于電子顯微鏡觀察。

4.在 Ni-NTA 柱純化過程中識別餾分中的 His 標簽蛋白。

5.檢測印跡和凝膠中的重組 His 標簽蛋白。

6.用于圖像分析和結構求解的規則結構的重原子標記。

7.用于 EM 的蛋白質融合標簽的金標記

Nanoprobes專注于免疫金標記和免疫測定試驗領域，為廣大科研機構提供用于檢測生物分子的靈敏的試劑和技術。艾美捷科技是Nanoprobes的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。