如何在 DNA(和 RNA)組合在一起后通過原位雜交來檢測它?接下來一起看看原位雜交:基因檢測的演變,從 Nanogold® 到 EnzMet™。
艾美捷 Nanoprobes 關于Nanogold®原位雜交的文章最近非常火,緊接著,一種強大的原位雜交新技術:EnzMet ™誕生了。
Nanoprobes的原位雜交技術都有自己的應用范圍;在這里收集了一些資源來幫助用戶選擇適合的研究領域的方法。
Human Pathology的專題文章討論了多種原位雜交檢測方法的發展、特點和比較優點,包括:
1.Nanogold® 銀增強
2.Nanogold® 與金增強 (GOLDFISH)
3.EnzMet ™(原名 酶金相)
這些原位雜交方法在開發用于HER2基因擴增的顯色測定的背景下進行了討論;這是乳腺癌中惡性腫瘤行為的重要指標,也是用于評估患者接受人源化單克隆抗體治療(赫賽汀)的標準之一。
艾美捷 Nanoprobes 金相原位雜交的演變:
(a)和(b):通過酪胺信號放大(TSA,也稱為CARD,或催化的報道分子沉積)檢測SiHa細胞中HPV-16的單拷貝,然后用(a)用DAB開發的鏈霉親和素-過氧化物酶檢測,和(b) streptavidin-Nanogold® 與醋酸銀自動金相學。HPV-16 的副本顯示為單點。(H & E 復染。原始放大倍數 X 560)。
(c) Nanogold® 與金增強 (GOLDFISH) 程序在具有 HER2 基因擴增的組織中,顯示來自緊密接近的多個基因拷貝的大的、匯合的核信號。核固紅復染劑(原始放大倍數 400)。
(d) : EnzMet™ 檢測石蠟包埋的人類浸潤性乳腺癌活檢中單個 HER2 基因拷貝的擴增;正常、未擴增的細胞包含 HER2 基因的兩個拷貝,而浸潤性 HER2 擴增的癌細胞顯示多個拷貝(原始放大倍數 X 400。圖片由克利夫蘭診所基金會的 RR Tubbs 博士提供)。
文獻參考:
1.Powell, R. D.; Pettay, J. D.; Powell, W. C.; Roche, P. C.; Grogan, T. M.; Hainfeld, J. F., and Tubbs, R. R.: Metallographic in situ hybridization. Hum. Pathol., 38, 1145-1159 (2007).
Abstract and full article available on the Human Pathology website
Institutional access at SciVerse ScienceDirect
2.Tubbs, R. R.; Pettay, J.; Skacel, M.; Downs-Kelly, E.; Powell, R. D.; Hicks, D. G., and Hainfeld, J. F.: Gold and Silver-Facilitated Metallographic In Situ Hybridization Procedures for Detection of HER2 Gene Amplification. In: Molecular Morphology in Human Tissues; Hacker G.W., and Tubbs, R. R. (Eds): CRC Press, Boca Raton, FL. Ch. 5, pp. 101-106 (2005).
Full text available from CRCNetBase (Shibboleth, Athens)
3.Tubbs, R.; Pettay, J.; Hicks, D.; Skacel, M.; Powell, R.; Grogan, T., and Hainfeld, J.: Novel bright field molecular morphology methods for detection of HER2 gene amplification. J. Mol. Histol., 35, 589-594 (2004).
Abstract and full text available from SpringerLink.
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