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Western印跡阻斷溶液是專為使用熒光色素結(jié)合抗體的Western blotting而設(shè)計的。建議使用純硝酸纖維素膜以獲得最佳性能??梢允褂闷渌?,例如嵌入載體中的PVDF或硝化纖維素,但可能會產(chǎn)生升高的背景。應(yīng)使用標準方案將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜。阻斷緩沖液可用于膜阻斷和稀釋初級和次級抗體。
艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液適用于Bio-Rad Laboratories、GE Healthcare、Alpha Innotech、FujiFilm Life Science、Licor Biosciences、UVP和Syngene生產(chǎn)的熒光Western Blot成像系統(tǒng)。熒光技術(shù)廣泛用于在可見光和近紅外范圍內(nèi)檢測蛋白質(zhì)。
當熒光色素結(jié)合抗體用于蛋白質(zhì)印跡和其他應(yīng)用中的蛋白質(zhì)可視化時,艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液允許卓丨越的信號檢測和較低的背景噪聲。
用IRDye®800和IRDye®700DX(Licor)制備的抗體綴合物™, Cy3™, Cy3.5™, Cy5™ 和Cy5.5™ (GE Healthcare),DyLight™405,動態(tài)光™ 549,DyLight™ 649,DyLight™ 680和DyLight™ 800(Thermo Fisher/Pierce)和Alexa Fluor®488、Alexa Floor®532、Alexas Fluor®546、Alexar Fluor®647和Alexas Floor®680(Invitrogen/Molecular Probe)已在各種平臺上進行了驗證,與其他相比,具有優(yōu)異的結(jié)果。
在幾乎沒有自發(fā)熒光發(fā)生的紅外范圍內(nèi),特定信號在任何背景下都非常明顯,提供了最佳的信噪比。這允許在皮克范圍內(nèi)檢測水平,其可與用于蛋白質(zhì)印跡的膜上化學發(fā)光的靈敏度相媲美。
當艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液用于western印跡或顯微鏡中的同時標記(多重)時,也可以看到優(yōu)異的結(jié)果,使用各種熒光色素組合進行多色成像。用該封閉的膜可以干燥并且非常穩(wěn)定??梢灾匦虑逑春?span style="font-family: Calibri;">/或重新掃描儲存的避光膜。
艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液實例展示:
圖:Rockland 熒光WB封閉緩沖液專門設(shè)計用于蛋白質(zhì)印跡熒光色素結(jié)合抗體,可用于膜分離阻斷并稀釋初級和次級抗體。制備該緩沖液使用溶于醫(yī)藥級水中的超純試劑(WFI)并由TRIS中的專有蛋白質(zhì)制劑組成pH 7.6的緩沖鹽水
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