前言:
G 蛋白偶聯受體 (GPCR) 和離子通道在許多信號轉導通路中發揮著重要作用,使它們成為治療和藥物發現的最大靶點。有超過 350 種非嗅覺 GPCR,它們是各種配體的受體,從小離子(例如,鈣、神經遞質、代謝物)到肽和糖蛋白激素。由于 GPCR 在許多疾病中發揮作用,包括癌癥、感染和炎癥,因此非常需要生產針對這些細胞表面信號傳遞受體蛋白的抗體。
挑戰:
與 GPCR 抗體開發相關的挑戰涉及 GPCR 的多個跨膜區域的特征。它們在細胞膜上只有一個小的、暴露的親水區域,使抗體難以靶向。除了暴露的小表位區域外,開發用于抗體開發的 GPCR 抗原也是一個挑戰。針對暴露的細胞外或細胞內區域開發肽可用于抗體開發;然而,由于 GPCR 和其他膜蛋白存在于親脂環境中,因此針對線性肽開發的許多這些抗體可能不會與天然蛋白結合。此外,它們在通常條件下不溶,使得 GPCR 抗原很難重組表達并以可溶形式分離以用于傳統的體外測定。
艾美捷ProSci離子通道和GPCR家族成員等跨膜靶標抗體開發方案:
為了克服為流式細胞術或任何需要 GPCR 天然結構的應用開發抗體的挑戰,保持 GPCR 的結構至關重要。這就是為什么我們從生成過表達細胞系開始的原因,這些細胞系將在細胞表面包含更多的 GPCR。此外,ProSci不是用單一蛋白質進行免疫,而是用完整的細胞進行免疫,這增加了產生 GPCR 抗體的機會。
兔單克隆抗體因其高親和力和特異性而特別適合檢測 GPCR。即使使用過表達細胞系來改善與分離 GPCR 抗原及其天然較低表達水平相關的挑戰,與其他抗原相比,GPCR 仍可能具有較低的表達水平。
因此,需要更有效的ProSci抗體來開發在 IHC 等應用中表現良好的抗 GPCR 抗體。用于重組兔單克隆抗體的篩選策略有利于選擇能夠與 GPCR 結合的理想抗體,作為具有高親和力、特異性和效力的*成熟 B 細胞的漿細胞分離篩選。
ProSci的抗體大都經免疫親和層析純化,具有高純度、高親和力、特異性強等特點,可用于免疫印跡(Western blot),免疫組織化學(IHC),免疫細胞化學(ICC),酶聯免疫吸附實驗(ELISA)和細胞流式分析(FACS)等應用。艾美捷科技是ProSci的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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