當前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術文章>>附文獻丨艾美捷T7 RNA聚合酶說明書
艾美捷T7 RNA聚合酶化學性質:
T7 RNA 聚合酶是一種依賴 DNA 的 RNA 聚合酶,其對噬菌體 T7 啟動子序列有高特異性。該酶從 T7 啟動子插入到轉錄載體下游的 DNA 上合成大量 RNA。
應用:標記和未標記的 RNA 轉錄本的合成。
來源:從在質粒上表達 T7 RNA 聚合酶基因的大腸桿菌純化獲得。
性能和質量檢驗:3′ 和 5′ 脫氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和 DNA 缺口檢測;
轉錄反應中的性能。
單位定義:一個單位是指在1 hr 內、37°C 下,以 T7 轉錄載體作為模板,將 1 nmoL 核糖核苷酸水解為酸性可沉淀物質所需要的酶量。
單位反應條件:40 mM Tris-HCl (pH 8.0)、25 mM NaCl、8 mM MgCl2、2 mM 亞精胺-(HCl)3、5 mM DTT、0.4 mM ATP、0.4 mM CTP、0.4 mM GTP、0.4 mM UTP、1µCi [3H]GTP、1 µg SphI-cut pT7L13 和酶(50 µL、10 min.、37°C 下)。
艾美捷T7 RNA聚合酶內容與儲存:
T7 RNA 聚合酶配有一瓶 5X 反應緩沖液 [200 mM Tris-HCl(pH 值 8.0)、40 mM MgCl2、10 mM 亞精胺-(HCl)3、125 mM NaCl] 和一瓶 100 mM DTT。保存于 -20°C。
艾美捷T7 RNA聚合酶文獻參考:
1、Novel binding of HuR and poly(C)-binding protein to a conserved UC-rich motif within the 3'-untranslated region of the androgen receptor messenger RNA.
Yeap Bu B; Voon Dominic C; Vivian Julian P; McCulloch Ross K; Thomson Andrew M; Giles Keith M; Czyzyk-Krzeska Maria F; Furneaux Henry; Wilce Matthew C J; Wilce Jackie A; Leedman Peter J;
J Biol Chem (2002) 277:27183-27275
2、Principles of 3' splice site selection and alternative splicing for an unusual group II intron from Bacillus anthracis.
Robart AR, Montgomery NK, Smith KL, Zimmerly S,
RNA (2004) 10:854-862
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