關于支原體檢測：

一般選擇血清學檢查、核酸檢測可以檢驗支原體，具體如下：1、臨床上對于支原體的檢測主要是檢測疑似感染者的血清學抗體，因為感染某種微生物以后人體會產生抗體；2、檢驗標本里的核酸，如果送檢痰或者血、尿液里有支原體核酸，也可以認為有感染情況。支原體是一種介于細菌、病毒之間的微生物，個頭比細菌稍微要小一點，但是比病毒大一些，可以透過濾菌器，在一般的培養基上培養不出來，需要特殊的培養基，這使得支原體檢測存在很多困難。

艾美捷支原體檢測試劑盒：

中文名稱：支原體檢測試劑盒

英文名字：Mycoplasma Detection Kit

編號：13100-01

規格：50Reactions

保存建議：-20℃可保存15個月，凍干粉重懸后需置于-20℃以下保存，避免反復凍融，如果每次進行檢測的樣本較少，請將三種試劑分裝保存

艾美捷支原體檢測建議的方案：

•試劑制備

•樣品制備

•熱循環計劃

•PCR主混合

o每次反應的總體積為50μL

在準備反應時，計算還應包括陽性和陰性對照

向每個試管中加入48μL主混合物

主混合料的內容如下-

注-如果使用Taq以外的聚合酶，則使用隨酶提供的PCR緩沖液和最終MgCl2濃度必須調整到3.0 mM

o向適當的PCR反應管中加入2μL不含DNase的水作為陰性對照

o將試劑盒中提供的2μL重組陽性對照DNA添加到適當的PCR反應管中

o將2μL熱處理試樣加入適當的PCR反應管中

o根據熱循環程序運行

•瓊脂糖凝膠電泳

•凝膠評價

o含有支原體感染的樣品將包含約448 bp至約611 bp之間的一條（或多條）帶

o含有所提供的內部對照DNA的樣品將含有明顯的270 bp PCR產物

可與陽性樣本中發現的約448bp至約611bp帶區分（見樣本數據，泳道7）

內部控制表明PCR反應成功

如果內部控制帶在某些樣品中消失，則可能發生PCR抑制，但該帶是

存在于陰性對照的PCR反應中（添加水代替測試樣品）

•如果樣品的PCR被抑制，則可以通過進行DNA分析來輕松去除抑制劑

提取

o如果細胞培養物被支原體嚴重污染，擴增約448 bp至約611 bp的產物可能

減少或完-全消除270 bp的內部控制產品（見樣本數據，泳道6）

o小于100 bp的低強度帶表明存在非特異性自退火引物；這不是

表示肯定的結果，并且不會影響測試的精度