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從基因到抗體
DNA免疫通過(guò)避免所有蛋白質(zhì)生產(chǎn)步驟來(lái)允許體內(nèi)抗原產(chǎn)生,并使用疏水性蛋白質(zhì)提供更好的結(jié)果。抗原通過(guò)所有翻譯后修飾顯示在其自然構(gòu)象上,與細(xì)菌或酵母生產(chǎn)相比,質(zhì)量顯著提高。DNA免疫是一種強(qiáng)大的替代方案,可縮短項(xiàng)目持續(xù)時(shí)間并增加項(xiàng)目成功的機(jī)會(huì),以獲得高度特異性的構(gòu)象抗體。
Covalab艾美捷丨協(xié)議概述:
基因克隆:
從定制質(zhì)粒中提取或從核序列中從頭合成。針對(duì)體內(nèi) DNA 矢量化優(yōu)化的專有質(zhì)粒。
免疫:
8只小鼠獨(dú)-家63天方案隨時(shí)間的免疫反應(yīng)性比較。
繡線菊一代:
脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞系融合。
ELISA 對(duì)生長(zhǎng)中的細(xì)胞雜交瘤進(jìn)行測(cè)試,以確認(rèn)雜交瘤的陽(yáng)性穩(wěn)定性。
雜交瘤選擇:
通過(guò)限制稀釋來(lái)接種細(xì)胞。
ELISA測(cè)試以確認(rèn)陽(yáng)性克隆和抗體生產(chǎn)穩(wěn)定性。
完-全同種分型和冷凍。
詳細(xì)協(xié)議:
基因克隆:
開發(fā)程序的第一步包括質(zhì)粒制備。質(zhì)粒可以由Covalab的服務(wù)設(shè)計(jì)、合成和克隆,也可直接發(fā)送。
然后將靶序列整合到Covalab針對(duì)體內(nèi)DNA矢量化進(jìn)行優(yōu)化的專有載體中
動(dòng)物免疫:
用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染動(dòng)物。蛋白質(zhì)過(guò)度表達(dá)會(huì)導(dǎo)致免疫反應(yīng)。根據(jù)專門為項(xiàng)目開發(fā)的檢測(cè)方法分析測(cè)試出血,以便在必要時(shí)調(diào)整方案。在免疫反應(yīng)低的情況下,可以進(jìn)行額外的注射和/或出血。
雜交瘤生成:
在根據(jù)Covalab的ELISA測(cè)試和客戶結(jié)果選擇合適的動(dòng)物后,開始提取其分泌免疫球蛋白的淋巴細(xì)胞。隨后篩選細(xì)胞以分離分泌單克隆抗體的單細(xì)胞。
雜交瘤選擇:
開發(fā)過(guò)程的最后一步包括使用限制稀釋方法接種先前選擇的雜交瘤,以便將克隆彼此分離。然后進(jìn)行ELISA測(cè)試,以鑒定以穩(wěn)定方式產(chǎn)生預(yù)期抗體的克隆,然后再對(duì)用戶選擇的克隆進(jìn)行完整表征。
Covalab專注于抗體研發(fā)領(lǐng)域,涵蓋抗體和試劑盒。擁有多種針對(duì)流行和罕見(jiàn)靶標(biāo)的一抗,涉及多種應(yīng)用領(lǐng)域,如癌癥,表觀遺傳學(xué),細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo),心血管等疾病的生物標(biāo)志物,神經(jīng)系統(tǒng),離子通道,微生物學(xué),病毒學(xué)等。還有特色的應(yīng)用于模式動(dòng)物斑馬魚的抗體。此外還有各種ELISA試劑盒,ELISPot試劑盒,FluoroSpot試劑盒等。艾美捷科技是Covalab的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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