*酶聯(lián)免疫試劑盒檢測步驟
準(zhǔn)備：將要使用的酶標(biāo)板條插入酶標(biāo)板架上，并記錄各標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置，為減小檢測值波動建議做雙孔平行實驗(每個樣本/標(biāo)準(zhǔn)品點兩孔)，未使用的酶標(biāo)板條用自封袋密封后，保存于2-8℃環(huán)境中以防變質(zhì)；
加樣：向?qū)?yīng)微孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品工作液/樣品溶液50 μL，向每孔中加入50 μL酶標(biāo)二抗工作液；再向每孔中加入50 μL抗體工作液；
孵育：輕輕振蕩酶標(biāo)板10 s，使孔內(nèi)液體充分混勻后，蓋好蓋板膜于25℃避光反應(yīng)20 min；洗滌：取出酶標(biāo)板后小心揭開蓋板膜，倒出板孔中液體后，在每孔加 250 μL洗滌工作液，浸泡15-30s后倒掉洗滌工作液，然后再加入洗滌工作液重復(fù)洗滌3~4次后，將酶標(biāo)板倒置于吸水紙上，用力拍干；
顯色：在每孔中加入100 μL 底物A和底物B的混合液(注：底物A液、底物B液必須按體積1:1充分混合，混合液在10 min內(nèi)使用，切不可使用金屬容器盛裝、攪拌試劑以免底物變質(zhì)失效)；
終止：在反應(yīng)后的微孔中加入終止液50μL/孔，底物液由藍(lán)變黃表明終止成功。
讀數(shù)：終止后的酶標(biāo)板應(yīng)在5 min內(nèi)用酶標(biāo)儀讀數(shù)，建議使用450 nm、630 nm雙波長讀取酶標(biāo)板吸光度值。
*酶聯(lián)免疫試劑盒利用*抗體與*可產(chǎn)生特異性結(jié)合的性質(zhì)，先在酶標(biāo)板上預(yù)包被抗原，再加入標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)和*抗體，樣本或標(biāo)準(zhǔn)品中的*藥物與固定在酶標(biāo)板上的抗原競爭*抗體，加入底物催化顯色。此時顯色深度與標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)中*藥物的含量成反比。
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