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腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293操作步驟

閱讀:117發布時間:2019-11-06

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                  腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293操作步驟

那年的十一月,那段的十一月,已經整整一年了,我清晰的記得那年的寒冷是不能用今年的寒冷來形容,冰冷的風不帶一點間隙的從四面八方洶涌而來,天空總是陰沉沉的,每天都在下著細雨,寒冷又叫人絕望。接下來介紹 腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293操作步驟

操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。

2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。


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