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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-13 09:08:04瀏覽次數(shù):394次
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人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF價(jià)格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF價(jià)格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 北京眼科研究所建系。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:10,11;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:13,14;D21S11:31,32.2;D2S1338:18,19;D3S1358:15;D5S818:10,12;D7S820:11;D8S1179:10,16;FGA:18,22;TH01:7,10;TPOX:8;vWA:14;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
規(guī)格:96T/48T倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒英文名稱:Hamster receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
規(guī)格:96T/48T倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒英文名稱:Hamster matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA K*
規(guī)格:96T/48T倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒英文名稱:Hamster Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒英文名稱:Hamster Cathepsin K,cath-K ELISA Kit *
規(guī)格:96T/48T大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒 英文名稱:Escherichia coli Protein,E.coli P ELISA Kit進(jìn)口/分裝
規(guī)格:96T/48T大豆凝集素(SBA)ELISA試劑盒 英文名稱:Soybean agglutinin,SBA ELISA Kit*
MAPK4(Mitogen-activated protein kinase 4) 原活化蛋白激酶4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
軸蛋白1Axin protein 1抗體 Anti-Axin1 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr1068) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
B27添加劑 (原裝) 10ml Gibco
ZNF750 英文名稱: 鋅指蛋白750抗體 0.2ml
DTNBP1 英文名稱: 精神分裂癥易感基因抗體 0.1ml
軸蛋白1Axin protein 1抗體 Anti-Axin1 0.1ml
Cav-1 ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Aurora B/FITC 熒光素標(biāo)記極光激酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EXTL 外生性骨疣樣蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
L-LDH ELISA Kit 大鼠L-鼠乳酸脫氫酶 96T
英文名稱: 抗體 0.2ml
AVEN 英文名稱: 細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑) 0.1ml
Anti-Aurora B/FITC 熒光素標(biāo)記極光激酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ANG-1 ELISA Kit 大鼠血管生成素1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-AKR1B1/ADR/FITC 熒光素標(biāo)記醛糖還原酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM161A FAM161A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
IL-29(human Interleukin 29) ELISA Kit 人白介素29 96T
(C1F3) 英文名稱: 單克隆抗體 0.1ml
phospho-AKT1/3 (Tyr473) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml
Anti-AKR1B1/ADR/FITC 熒光素標(biāo)記醛糖還原酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人腦血管平滑肌細(xì)胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管外膜成纖維細(xì)胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管周細(xì)胞英文名稱:HBVP*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:HCPEC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞英文名稱:HCPEpiC *規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞英文名稱:HCPF*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦膜細(xì)胞英文名稱:HMC*規(guī)格:5 x 10^6 cells/vial
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