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上海撫生實業(yè)有限公司
人髓母細胞瘤細胞;Daoy品牌冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細胞名稱 人髓母細胞瘤細胞;Daoy品牌
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是1985年由Jacobsen PF建立的,源自一名4歲大的兒童的后顱窩腫瘤的活檢組織,未檢出神經元和膠質分化的特征;可用作轉染宿主。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:4~1:6傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C4
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
S
公司是*的ATCC細胞供應商,提供人髓母細胞瘤細胞;Daoy品牌的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。
復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
Anti-STAT5/FITC 熒光素標記信號轉導和轉錄激活因子5(STAT5)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
蛋白激酶C抗體 Anti-PKC 0.1ml
S6PDH 英文名稱: 6-磷酸*脫氫酶抗體 0.2ml
E1 Ubiquitin Activating Enzyme 英文名稱: 泛素激活酶E1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-mTOR (Tyr) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
phospho-KLF5/Krueppel-like factor 5 (pSer272) 磷酸化腸道內富含的Kruppel樣因子5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-AFP 甲胎蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Caspase 6 (Ser257) 磷酸化半胱胺酸蛋白酶蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml
兔血清封閉液 10ml Gibco原料,2%血清
VGF/NERP2 英文名稱: 神經內分泌調節(jié)肽VGF抗體 0.1ml
DNA polymerase delta p50 英文名稱: DNA聚合酶δ2/DNA pol δ 2抗體 0.2ml
Anti-AFP 甲胎蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人腦血管平滑肌細胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管外膜成纖維細胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管周細胞英文名稱:HBVP*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡叢內皮細胞英文名稱:HCPEC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡叢上皮細胞英文名稱:HCPEpiC *規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡叢成纖維細胞英文名稱:HCPF*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦膜細胞英文名稱:HMC*規(guī)格:5 x 10^210 cells/vial
規(guī)格:96T/48T人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA試劑盒 英文名稱:Human dopamine-β-hydroxylase,DBH ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒 英文名稱:Human dopamine decarboxylase,DDC ELISA Kit進口/分裝
規(guī)格:96T/48T人多巴色素異構酶(DT)ELISA試劑盒英文名稱:Human dopachrome tautomerase,DT ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T人多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試劑盒英文名稱:human versican/PG-M/PG-350,VS ELISA Kit進口/原裝
規(guī)格:96T/48T人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Poly ADP ribose polymerase,PARP ELISA Kit 進口/原裝
規(guī)格:96T/48T人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Poly Serium Antigen,PHSA ELISA Kit進口/分裝
Fas-L human 人凋亡相關因子配體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti- Glu-Glu tag抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NOX5 還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/*腺嘌呤二核苷酸磷酸抗體 規(guī)格 0.2ml
AChRab-M1(Mouse acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 小鼠乙酰*受體-M1抗體 96T
TP53I11 英文名稱: 蛋白P53誘導蛋白11抗體 0.2ml
C6orf203 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框203抗體 0.2ml
Anti- Glu-Glu tag抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
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