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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-17 12:34:21瀏覽次數(shù):250次
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小鼠骨髓細胞;FDC-P1品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供的小鼠骨髓細胞;FDC-P1品牌報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細胞名稱 小鼠骨髓細胞;FDC-P1品牌
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣;單個或成簇生長
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞是從在WEHI-3細胞條件化培養(yǎng)基中*培養(yǎng)的DBA/2小鼠正常骨髓細胞建立的;細胞的持續(xù)生長依賴于WEHI-3細胞的條件化培養(yǎng)基。該細胞表達Thy-1.2 (24%)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;IL-3
傳代方法 1:
3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 32~34,個別細胞染色體數(shù)為62,64
使用權(quán)限 A類
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
Anti-PEA3/FITC 熒光素標記多瘤促活化因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
rec Protein G/FITC 熒光素標記重組純化蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子抗體 Anti-EpCAM 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
factor VIII 英文名稱: *8/第八*/第八因子相關(guān)抗原抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr205) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
rec Protein G/FITC 熒光素標記重組純化蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
Anti-SPHK2/FITC 熒光素標記鞘氨醇激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
血小板活化因子抗體 Anti-PAF 0.1ml
SPINK1 英文名稱: 相關(guān)*抑制劑1抗體 0.2ml
ENO3 英文名稱: 骨骼肌烯醇化酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NFKB1(Ser338) 磷酸化細胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 規(guī)格 0.1ml
ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CCL12/MCP5 單核細胞趨化蛋白5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHA2 原鈣粘附蛋白α2抗體 規(guī)格 0.2ml
CD3D Kit Human 人 CD3d / CD3 delta ELISA配對抗體 ELISA
TM7SF2 英文名稱: 脫氫*還原酶14抗體 0.2ml
Caspase-13 + 4 英文名稱: 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體 0.2ml
Anti-CCL12/MCP5 單核細胞趨化蛋白5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-obestatin/Ghrelin/GHRP /FITC 熒光素標記肥胖抑制素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗雞IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
周期素依賴性激酶1抗體 Anti-CDK1 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的羊抗IgG 0.1ml
FAM62C 英文名稱: 延伸突觸蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PLASTIN3/T Plastin 絲束蛋白T Plastin抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗雞IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
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