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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2018-04-20 12:01:20瀏覽次數(shù):120次
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發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞;G1品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞;G1品牌
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞;G1品牌的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Anti-HCV-NS4a/FITC 熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS4a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-Paxillin (Tyr118)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化樁蛋白Paxillin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh BAG5 BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體 規(guī)格 0.2ml
ALK (Anaplastic Lymphoma Kinase)(CD246Ag) 間變型淋巴瘤激酶(抗原) 0.5mg
GBP2 英文名稱: G蛋白結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-Rat IgG whole serum 兔抗大鼠IgG抗血清 規(guī)格 1ml
Anti-Phospho-Paxillin (Tyr118)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化樁蛋白Paxillin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NAP-2/CXCL7(Human neutrophil activating protein-2) ELISA Kit 人中性粒細(xì)胞趨化蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CXCL4/PF-4 血小板因子4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MMP-9 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體 規(guī)格 0.1ml
MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶13 96T
RSL1D1 英文名稱: 細(xì)胞衰老抑制基因蛋白抗體 0.2ml
phospho-Cdc6 (Ser54) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 0.1ml
Anti-CXCL4/PF-4 血小板因子4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-WNT9A/WNT14/FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt9a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
factor V(Vcoagulation factor) *5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
ATP結(jié)合蛋白家族5抗體 Anti-ABCB5/ 0.1ml
phospho-CK II beta (Ser209) 英文名稱: 磷酸化絲酸/蘇酸蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗體 0.1ml
Epac2 英文名稱: *核苷酸交換因子4 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO1 (Ser319) 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體 規(guī)格 0.1ml
factor V(Vcoagulation factor) *5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
T ELISA Kit 大鼠睪酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ATH III /FITC 熒光素標(biāo)記抗*Ⅲ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh factor VIII(FVIII) human 第八因子相關(guān)抗原抗體 規(guī)格 0.1ml
CD4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD4分子 96T
MDM2 英文名稱: 雙微體2癌基因抗體 0.1ml
AKAP13 英文名稱: 蛋白激酶錨定蛋白13抗體 0.1ml
Anti-ATH III /FITC 熒光素標(biāo)記抗*Ⅲ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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