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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-20 12:08:25瀏覽次數(shù):188次
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雜交瘤細(xì)胞;S-171-9價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
雜交瘤細(xì)胞;S-171-9價格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞;S-171-9價格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
IL-27 ELISA Kit 大鼠白介素27Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-V.cholera Ogawa 01群小川型霍亂弧菌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GAD65 *脫羧酶-65抗體(C端) 規(guī)格 0.1ml
26S PSM ELISA Kit 大鼠26S蛋白酶體 96T
Neurotensin 英文名稱: 神經(jīng)緊張素抗體 0.1ml
phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263) 英文名稱: 磷酸化乙酰*羧化酶抗體 0.1ml
Anti-V.cholera Ogawa 01群小川型霍亂弧菌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TIEG1(Human TGF-beta-inducible early response gene-1) ELISA Kit 人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Histone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mesothelin 間皮素抗體 規(guī)格 0.1ml
BetaGD(Human Beta-glucuronidase) ELISA Kit 人β葡萄糖醛酸苷酶 96T
RRAGC 英文名稱: RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白C抗體 0.2ml
CHIP 英文名稱: E3泛素蛋白連接酶CHIP蛋白抗體 0.1ml
Anti-Histone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-IDE/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素降解酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-PKN2 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶N2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSF 芳香基酯酶F抗體 規(guī)格 0.2ml
Donkey Anti-human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GCAP2 英文名稱: 鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-PKN2 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶N2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
GATA-3(GATA binding factor 3) GATA結(jié)合蛋白3抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
EPHB2 EPHB2 / Hek5 兔單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-DAXX (Ser213) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
廣譜非預(yù)染蛋白Marker分子量標(biāo)準(zhǔn)(5-250kDa) 2x250μl/100次 MBI原裝
ZNF474 英文名稱: 鋅指蛋白474抗體 0.1ml
phospho-DNA PKcs (Ser2612) 英文名稱: 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體 0.1ml
EPHB2 EPHB2 / Hek5 兔單抗 (PE) Human
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