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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-23 11:57:29瀏覽次數(shù):199次
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雜交瘤細(xì)胞株;5D1價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
雜交瘤細(xì)胞株;5D1價格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株;5D1價格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
(Ntn1)ELISA Kit 大鼠軸突生長誘向因子1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Synphilin-1 synphilin-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) ELISA Kit 人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子 96T
Nectin 4 英文名稱: 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
BRN4 英文名稱: 腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體 0.2ml
Anti-Synphilin-1 synphilin-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody) ELISA Kit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IL-17 (mouse, rat) 白介素-17抗體(小鼠,大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Lyn 膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體 規(guī)格 0.2ml
HDL(Human High density lipoprotein) ELISA Kit 人高密度脂蛋白 96T
RAB3A 英文名稱: ras癌基因家族Rab3a抗體 0.1ml
phospho-Crk p38 (Tyr221) 英文名稱: 磷酸化Crk p38抗體 0.1ml
Anti-IL-17 (mouse, rat) 白介素-17抗體(小鼠,大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870)/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-VWF/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 Anti-ATF3 0.2ml
Goat Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml
GPCR TGR7 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體TGR7蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PRC1 胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-VWF/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit 大鼠抗IVIgG抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ZNF268 鋅指脂蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh FTO/Protein fatso 脂肪堆積和肥胖相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
IGFBP2(Human insulin-like growth factors binding protein 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2 96T
Nidogen 2 英文名稱: 巢蛋白NID2抗體 0.2ml
APOBEC3B 英文名稱: 載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3B抗體 0.2ml
Anti-ZNF268 鋅指脂蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
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