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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-24 09:03:36瀏覽次數(shù):457次
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小鼠胚胎細胞;BABL/C-E價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
小鼠胚胎細胞;BABL/C-E價格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細胞名稱 小鼠胚胎細胞;BABL/C-E價格
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一13-14天的小鼠胚胎組織。2000年由*昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199:
with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
GATA4 ELISA Kit muman 人GATA結(jié)合蛋白4 ELISA試劑盒Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-STAT1 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
iNOS(Mouse inducible nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶 96T
NDUFS3 英文名稱: 線粒體復(fù)合物NDUFS3蛋白抗體 0.2ml
BCL2 interacting protein 英文名稱: BCL2相互作用蛋白質(zhì)抗體 0.2ml
Anti-STAT1 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Ifi205(Human interferon activated gene 205) ELISA Kit 人干擾素活化基因205Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PAX3 配對盒基因3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HOPX/LAGY 肺癌相關(guān)蛋白Y抗體 規(guī)格 0.2ml
SOD(Mouse Super Oxidase Dimutase)ELISA Kit 小鼠超氧化物歧化酶 96T
PTHLH 英文名稱: 甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
CDC40 英文名稱: 細胞分裂周期同源蛋白40抗體 0.2ml
Anti-PAX3 配對盒基因3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-phosphor-LKB1(Ser334)/FITC 熒光素標記磷酸化*/*蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-SYT3/FITC 熒光素標記突觸結(jié)合蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADO 2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/Bio *標記的兔抗羊IgG 0.1ml
GPR136 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體136抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-chicken IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗雞IgM 規(guī)格 0.3ml
Anti-SYT3/FITC 熒光素標記突觸結(jié)合蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
F VIII -Ag ELISA Kit 大鼠*Ⅷ相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-WNK4 WNK4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GABRA1 G1氨基丁酸A型受體α1抗體 規(guī)格 0.1ml
Human fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 人趨化因子 96T
Neprilysin 2 英文名稱: 腦啡肽酶2抗體 0.2ml
ARSI 英文名稱: 芳香基酯酶家族蛋白1抗體 0.2ml
Anti-WNK4 WNK4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
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