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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR價(jià)格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR價(jià)格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
Human insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit 人胰島素自身抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Selenoprotein W 硒蛋白W抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GPR70/T1R1 蛋白偶聯(lián)受體70抗體 規(guī)格 0.2ml
MBP(Human myelin basic protein autoantibody) ELISA Kit 人髓鞘堿性蛋白抗體 96T
ANKRD45 英文名稱: /抗原117 0.1ml
Bex1 英文名稱: 腦組織表達(dá)X連鎖蛋白1抗體 0.2ml
Anti-Selenoprotein W 硒蛋白W抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
AQP-4(Human Aquaporin 4) ELISA Kit 人水通道蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MKK3 原活化蛋白激酶MKK3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh human C3 補(bǔ)體C3抗體 規(guī)格 0.1ml
PROG(Mouse Progesterone)ELISA Kit 小鼠孕激素/孕酮 96T
PNMA1 英文名稱: 旁瘤抗原MA1抗體 0.2ml
CCDC28A 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體 0.2ml
Anti-MKK3 原活化蛋白激酶MKK3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-JAM1/CD321/FITC 熒光素標(biāo)記連接粘附分子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-KT3 tag/FITC 熒光素標(biāo)記KT3 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CCDC158 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體 規(guī)格 0.2ml
GRO Alpha/GRO/MGSA/CXCL1 protein (growthregulated oncogene Alpha) 生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子α 抗原 0.5mg
HAAO 英文名稱: 3-羥苯雙加氧酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Smad4 Smad4抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-KT3 tag/FITC 熒光素標(biāo)記KT3 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NE ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TSARG3 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GHR 生長激素受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Hyp(Mouse hydroxyproline) ELISA KIT 小鼠羥脯酸 96T
NKG2A 英文名稱: NK細(xì)胞受體2A抗體 0.2ml
AGXT2L2 英文名稱: AGXT2L2蛋白抗體 0.2ml
Anti-TSARG3 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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