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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-24 10:59:14瀏覽次數(shù):486次
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犬腎細胞;MDCK(NBL-2)品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供的犬腎細胞;MDCK(NBL-2)品牌報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細胞名稱 犬腎細胞;MDCK(NBL-2)品牌
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 1958年,Madin SH和Darby NB從表觀正常的成年雌性科克獵犬的腎建立了MDCK細胞株。角蛋白陽性。該細胞曾被用于研究β淀粉前體蛋白的形成及其蛋白水解產(chǎn)物的分類。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:6傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+2
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)品牌冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)品牌復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
Anti-CD44v4 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD44V4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TRT/TERT/PE 熒光素PE標記端粒酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CD7 CD7抗體 規(guī)格 0.1ml
PARP(poly ADP-ribose polymerase)N-Terminus 多腺苷二磷酸多聚酶抗原(N端) 0.5mg
I-309 英文名稱: 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh TAP2/ABCB3 ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運因子2抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-TRT/TERT/PE 熒光素PE標記端粒酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Human Pancreatic Polypeptide,PP ELISA Kit 人胰多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SEL1L SEL1L抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GPR71/T1R2 蛋白偶聯(lián)受體71抗體 規(guī)格 0.2ml
PI3K ELISA Kit 大鼠磷酸肌醇3激酶 96T
OAZ2 英文名稱: 鳥酸脫羧酶抗酶2抗體 0.2ml
BLNK 英文名稱: B淋巴細胞連接蛋白抗體 0.1ml
Anti-SEL1L SEL1L抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit 人苯*Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Fascin1 纖維束1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Histone H3 (Di Methyl K9) 二甲基化組蛋白H3K9抗體 規(guī)格 0.1ml
BA(Human Blocking antibody) ELISA Kit 人封閉抗體 96T
PMVK 英文名稱: 磷酸甲羥戊酸激酶抗體 0.1ml
C19orf71 英文名稱: 19號染色體開放閱讀框71抗體 0.1ml
Anti-Fascin1 纖維束1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)品牌Anti-ERCC1/FITC 熒光素標記抗切除修復(fù)交叉互補基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-MTA1/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C1orf180/AIDA 1號染色體開放閱讀框80抗體 規(guī)格 0.2ml
CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原 0.5mg
HABP4 英文名稱: 透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RRAS 原癌基因R-Ras抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-MTA1/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)品牌注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
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