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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-25 09:52:24瀏覽次數(shù):333次
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非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7品牌報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7品牌
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 Vero-HCV-P7細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的P7基因,能穩(wěn)定表達(dá)P7蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C23
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Anti-MIP-1 Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記壞死因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACBD4 ?;?結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Avidin/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml
GPR101 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體101抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Avidin/FITC FITC標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格 0.1ml
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記壞死因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-IL-28B/IL-28C/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素28B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-RELMa/FITC 熒光素標(biāo)記抵抗素樣分子α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Annexin II/Annexin A2 膜粘連蛋白 Ⅱ抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.5ml
GPR162 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPR162蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-RELMa/FITC 熒光素標(biāo)記抵抗素樣分子α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PTK/CD115(Human protein tyrosine kinase) ELISA Kit 人蛋白*激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NOS-2/iNOS 一氧化氮合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IKK beta/IKB KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-16 ELISA KIT 大鼠白介素16 96T
PI 3 Kinase p85 beta 英文名稱: 磷脂酰肌醇激酶p85β抗體 0.1ml
CXorf36 英文名稱: 脫羧酶蛋白體36抗體 0.2ml
Anti-NOS-2/iNOS 一氧化氮合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-phospho-Pyk2 (Tyr881) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化富含*的*激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-NDRG1 (Ser330)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C12ORF61 12號染色體開放閱讀框61抗體 規(guī)格 0.2ml
PDGF-B 血小板源性生長因子-B(抗原) 0.5mg
HE4 英文名稱: 附睪分泌蛋白4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF34 環(huán)指蛋白34抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Phospho-NDRG1 (Ser330)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
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