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人胎球蛋白A(FETUA)ELISA試劑盒說明書
閱讀:61 發(fā)布時間:2020-3-20人胎球蛋白A(FETUA)ELISA試劑盒
英文簡稱:People fetuin A (FETUA) ELISA kit
產(chǎn)品貨號:KS15189
品牌名稱:科順生物
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運(yùn)輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.
人胎球蛋白A(FETUA)ELISA試劑盒實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠胰島素(INS)水平。用純化的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。
人胎球蛋白A(FETUA)ELISA試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 |
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封板膜 | 2片 | 2片 |
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密封袋 | 1個 | 1個 |
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酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
人胎球蛋白A(FETUA)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人胎球蛋白A(FETUA)ELISA試劑盒操作步驟
- 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
- 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
- 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
- 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
- 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
- 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
- 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
- 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
- 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人胎球蛋白A(FETUA)ELISA試劑盒注意事項:
- 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
- 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
- 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
- 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
- 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
- 底物請避光保存。
- 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
- 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
- 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
計算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
人胎球蛋白A(FETUA)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
KS17367 羊白介素7(IL7)ELISA試劑盒
KS17368 羊α晶體B鏈(CRYAB)ELISA試劑盒
KS17369 羊游離三dian甲狀腺原氨酸(fT3)ELISA試劑盒
KS17370 羊基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)ELISA試劑盒
KS17371 羊饑餓素(GHRL)ELISA試劑盒
KS17372 羊干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒
KS17373 小尾寒羊增食欲素(orexin)ELISA試劑盒
KS17374 小尾寒羊瘦素(LEP)ELISA試劑盒
KS17375 小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒
KS17376 山羊轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒
KS17377 山羊轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒
KS17378 山羊脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒
KS17379 山羊脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒
KS17380 山羊孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒
KS17381 山羊胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)ELISA試劑盒
KS17382 山羊胰島素樣生長因子1(IGF1)ELISA試劑盒
KS17383 山羊胰島素(INS)ELISA試劑盒
KS17384 山羊血小板衍生生長因子BB(PDGFBB)ELISA試劑盒
KS17385 山羊血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
KS17386 山羊血漿α顆粒膜蛋白(GMP140)ELISA試劑盒
KS17387 山羊血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
KS17388 山羊血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒
KS17389 山羊血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒
KS17390 山羊血管緊張素Ⅰ(ANGⅠ)ELISA試劑盒
KS17391 山羊褪黑素(MT)ELISA試劑盒
KS17392 山羊銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒
KS17393 山羊瘦素(LEP)ELISA試劑盒
KS17394 山羊生長激素(GH)ELISA試劑盒
KS17395 山羊三dian甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒
KS17396 山羊熱休克蛋白70(HSP70)ELISA試劑盒
KS17397 山羊醛固酮(ALD)ELISA試劑盒
KS17398 山羊前列腺素G/H合酶2(PTGS2)ELISA試劑盒
KS17399 山羊前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒
KS17400 山羊*(Cortisol)ELISA試劑盒
KS17401 山羊腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒