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生成N羥基琥珀酰亞胺酯、環氧基等活性基團直接與各種配體偶聯。引入間隔臂的基質與配體結合時，另外也可以通過進一步的活化處置。配體就可以離開基質一定的空間，從而可以減少空間位阻效應，易于與待分離物質結合。

　　由于配體結合在基質上，親和層析中。與待分離的生物大分子結合時，很大水平上要受到基質和待分離的生物大分子間的空間位阻效應的影響。尤其是當配體較小或待分離的生物大分子較大時，由于直接結合在基質上的小分子配體非常靠近基質，而待分離的生物大分子由于受到基質的空間障礙，使得其與配體結合的部位無法接近配體，影響了待分離的生物大分子與配體的結合，造成吸附量的降低。解決這一問題的方法通常是配體和基質之間引入適當長度的間隔臂"即加入一段有機分子，使基質上的配體離開基質的骨架向外擴展伸長，這樣就可以減少空間位阻效應，大大增加配體對待分離的生物大分子的吸附效率。加入手臂的長度要恰當，太短則效果不明顯；太長則容易造成彎曲，反而降低吸附效率。

　　R通常是氨基或羧基，n一般為212例如Pharmacia公司生產的AHSepharos4B和CHSepharos4B就是分別將1,引入間隔臂分子常用的方法是將適當長度的氨基化合物NH2CH2nR共價結合到活化的基質上。6乙二胺，6氨基乙酸與CNBr活化的瓊脂糖反應引入間隔臂分子。二者的末端分別為氨基或羧基，通過碳二亞胺的縮合作用可以分別與含羧基或氨基的配體偶聯。