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技術(shù)文章

恢復(fù)培養(yǎng)冷凍干燥保藏菌種的轉(zhuǎn)接技術(shù)

閱讀:45          發(fā)布時(shí)間:2024-10-9

冷凍干燥保藏轉(zhuǎn)接技術(shù)

  建議用下列方法恢復(fù)培養(yǎng)冷凍干燥保藏的菌種。

  1、安瓶管開封

  用浸過70%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。

  用火焰將安瓿管頂端加熱。

  滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。

  用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。

  2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)

  用無菌吸管,吸取0.3-0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴人安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍于菌體溶解呈懸浮狀

  取0.1-0.2ml菌體懸浮液,移植于適宜的瓊脂斜面/平板培養(yǎng)基上,剩余的菌液,注入適宜的液體培養(yǎng)基內(nèi),然后在建議的溫度下培養(yǎng)。

  3、注意事項(xiàng)

  菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6一10℃的環(huán)境下。

  厭氧菌的培養(yǎng),如無特別說明,自開封至接種完成,均需以無氧氣體充填,以保持厭氧狀態(tài)。

  某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長,此時(shí)請(qǐng)將步驟二重復(fù) 一次。


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