產(chǎn)品名稱：瓊脂糖凝膠4B

英文名稱：ECH Sepharose 4B

外觀（性狀）：顆粒單位：瓶

羧基-瓊脂糖凝膠4B：分離試劑，層析介質(zhì)。

產(chǎn)品簡介

羧基-瓊脂糖凝膠4B是用由環(huán)氧樹脂耦合方法將6-氨基已酸共價鍵偶聯(lián)到瓊脂糖4B上。羧基-瓊脂糖凝膠4B含有一個10個碳原子連接臂自由羧基，耦合氨基基團的配體。長長的間隔臂使它特別適合固定的小分子。

產(chǎn)品參數(shù)

產(chǎn)品名稱：羧基-瓊脂糖凝膠4B (ECH Sepharose 4B)

貨號：S9410

基質(zhì)：4%瓊脂糖凝膠

耦合基團：氨基

顆粒大小：90μm

大流速：75cm/h

工作pH：3-14

操作溫度：室溫

保存條件：貯存于4°C-8°C（保存溶液為20%乙醇）

使用方法

1.乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;

2.無鹽水浸泡：室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹，然后；

3.鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗只中性；

4.將溶脹好的凝膠脫氣后（真空抽濾或超聲波）根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層；

5.上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止（流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值）；

6.凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整；脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(yīng)當盡可能避免。難分離物質(zhì)要有定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1即可；

7.洗脫方法：可以用無鹽水，也可以采用上柱時的緩沖液洗脫；在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化；

8.在位清洗（CIP）凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。