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甲苯胺藍-DNA瓊脂操作步驟

時間:2021/4/19閱讀:330
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產品名稱:甲苯胺藍-DNA瓊脂
英文名稱:Toluidine Blue-DNA Agar
規格:250g
有效期:三年
用途:甲苯胺藍-DNA瓊脂用于金黃色葡萄球菌的耐熱核酸酶的試驗。
貯 存: 甲苯胺藍-DNA瓊脂于2~8℃避光貯存

原 理:
具有脫氧核糖核酸酶的細菌分解培養基中的脫氧核糖核酸(DNA),使DNA長鏈水解成數個單核苷酸的寡核苷酸短鏈,使指示劑甲苯胺藍作用變成粉紅色;氯化鈣提供陽離子作為激活劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓;三羥甲基氨基甲烷為緩沖劑;瓊脂為培養基的凝固劑。

配方(每升):
脫氧核糖核酸(DNA)  0.3g
氯化鈣  0.0011g
氯化鈉  10g
甲苯胺藍  0.083g
三羥甲基氨基甲烷  6.1g
瓊脂   10g
蕞終pH  9.0±0.2
    
使用方法:
1. 稱取 甲苯胺藍-DNA瓊脂26.5g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,115℃高壓滅菌15min(即用可不需滅菌),備用。
2. 載玻片的制備:取3mL甲苯胺藍-DNA瓊脂平鋪于在載波片上制成標本,待瓊脂凝固后,在瓊脂上打成直徑2mm的小洞(每個載玻片10-12個),抽出小洞中的瓊脂塊。
3.從Baird-parker平板挑一個可疑單菌落接種普通肉湯培養基中,36±1℃培養20h~24h后,經過100℃沸水煮15min,取0.01mL接種所制備的載玻片上小洞,于35℃培養4h后,觀察結果。

質量控制:
質控菌株接種后,于35℃培養4h結果如下:按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養24±2小時。

 

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