中文名稱：碘化丙啶PI染色液(50ug/ml,含RNase)
產品規格：10ml
分類：細胞染色
用途：流式細胞儀分析細胞凋亡、細胞周期等，主要用于DNA染色。
注意事項：Propidium Iodide簡稱PI，又稱碘化丙啶，分子量為668.40，對人體有刺激性，本試劑中含Rnase A，RNase濃度200ug/ml。
儲存條件：-20℃，避光，6個月

簡介：碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種可以嵌合到雙鏈DNA和RNA的堿基對中并與之結合的熒光染料，無堿基特異性。碘化丙啶與雙鏈DNA結合后可以產生熒光，并且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比。細胞內的DNA被Propidium Iodide染色后，可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定，然后根據DNA含量的分布情況，可以進行細胞周期和細胞凋亡的分析。碘化丙啶染色后，假設G0/G1期細胞的熒光強度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2，正在進行DNA復制的S期細胞的熒光強度為1～2之間。碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase)主要由PI、破膜劑、RNase等組成，經常用于培養的貼壁或懸浮細胞的細胞周期與細胞凋亡檢測， 亦可用于區分細胞凋亡和細胞壞死。

操作步驟(僅供參考)：
1、細胞樣品的制備：
⑴貼壁細胞：
① 收集上述細胞懸液到離心管內。
② 4℃，1000g離心，使細胞沉到管底。小心吸取上清并丟棄，可留大約50μl培養液，以免吸走細胞。
③ 加入約1ml提前預冷的PBS，重懸細胞，并轉移至1.5ml無菌離心管。
④ 4℃ 離心，使細胞沉到管底。
⑤ 小心吸取上清并丟棄，可留大約50μl PBS，以免吸走細胞。
⑥ 輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。

⑵懸浮細胞：
① 4℃離心，使細胞沉到管底。
② 小心吸取上清并丟棄，可留大約50μl培養液，以免吸走細胞。
③ 加入約1ml提前預冷的PBS，重懸細胞，并轉移至1.5ml無菌離心管。
④ 4℃離心，使細胞沉到管底。
⑤ 小心吸取上清并丟棄，可留大約50μl PBS，以免吸走細胞
⑥ 輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。

2、細胞的固定：加入1ml冰浴預冷70%乙醇中，輕輕吹打混勻，4℃條件下固定2h或更長時間。4℃固定12～24h可能效果更佳。

3、細胞的清洗：
① 4℃ 離心，使細胞沉到管底。
② 小心吸取上清并丟棄，可留大約50μl溶液，以免吸走細胞。
③ 加入約1ml提前預冷的PBS，重懸細胞，并轉移至1.5ml無菌離心管。
④ 4℃ 離心，使細胞沉到管底。
⑤ 小心吸取上清并丟棄，可留大約50μl PBS，以免吸走細胞。
⑥ 輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。

4、 PI染色：在每個待檢細胞樣品中加入500μl配制好的PI染色工作液，輕輕重懸細胞沉淀，置于37℃避光水浴。
5、檢測與分析：用流式細胞儀在激發波長488nm波長處檢測紅色熒光，同時檢測光散射情況。采用適當分析軟件進行細胞DNA或RNA含量分析和光散射分析。  

注意事項：
1、 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測。
2、 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
3、 在為了獲得細胞沉淀的離心的過程中，對于特殊細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當提高離心力或延長離心時間。
4、 如果用于組織的細胞周期與細胞凋亡檢測，則必須把組織消化后，制備成單細胞懸液
5、 PI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。