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明膠液化試驗(yàn)方法

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原理:指細(xì)菌把明膠膠分解成液狀的現(xiàn)象。這種能力可因細(xì)菌種類(lèi)不同而有顯著差異,因此很早以來(lái)就被用來(lái)作為鑒別、測(cè)定細(xì)菌的一種特征。例如:葡萄球菌屬、變形菌屬、芽孢桿菌屬均具有液化能力,而大腸桿菌就無(wú)這種液化能力。由于明膠是在熱水中溶解膠原(collagen)而成的蛋白質(zhì),因此,它是由產(chǎn)生于體外的蛋白酶進(jìn)行分解的。用血清或蛋清清蛋白代替明膠也可看到大致相同的現(xiàn)象。

試驗(yàn)方法:挑取18~24h待試菌培養(yǎng)物,以較大量穿刺接種于明膠高層約2/3深度或點(diǎn)種于平板培養(yǎng)基。于20~22℃培養(yǎng)7~14天。明膠高層亦可培養(yǎng)于36±1℃。每天觀(guān)察結(jié)果,若因培養(yǎng)溫度高而使明膠本身液化時(shí)應(yīng)不加搖動(dòng)、靜置冰箱中待其凝固后、再觀(guān)察其是否被細(xì)菌液化,如確被液化,即為試驗(yàn)陽(yáng)性。平板試驗(yàn)結(jié)果的觀(guān)察為在培養(yǎng)基平板點(diǎn)種的菌落上滴加試劑,若為陽(yáng)性,10~20min后,菌落周?chē)鷳?yīng)出現(xiàn)清晰帶環(huán)。否則為陰性。

注意事項(xiàng):
(1)如有的菌在20℃不生長(zhǎng)則在30℃培養(yǎng)生長(zhǎng)后,觀(guān)察時(shí)放冰箱或冷水中降溫,待對(duì)照管凝固后再記錄。
(2)滅菌過(guò)高或過(guò)低易影響結(jié)果,一般用115℃蒸汽滅菌15min較為合適。

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