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冰凍切片快速抗原修復(fù)液使用方法

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產(chǎn)品名稱(chēng):冰凍切片快速抗原修復(fù)液
規(guī)    格:100ml
用    途:適合用于冰凍切片的快速抗原修復(fù)液,只需室溫孵育5分鐘即可完成對(duì)冰凍切片樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定后的抗原修復(fù)。
注意事項(xiàng):本抗原修復(fù)液含有了廣泛使用的SDS等抗原修復(fù)試劑等,pH值約為7.4,可以快速有效地去除醛類(lèi)固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)。
儲(chǔ)存條件:4℃,12個(gè)月

簡(jiǎn)介:
冰凍切片快速抗原修復(fù)液是一種特別適合用于冰凍切片的快速抗原修復(fù)液,只需室溫孵育5分鐘即可完成對(duì)冰凍切片樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定后的抗原修復(fù)。本產(chǎn)品特別適合用于冰凍切片的抗原修復(fù)并用于后續(xù)的免疫染色。

通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理。抗原修復(fù)會(huì)大大改善石蠟切片的免疫染色效果,但對(duì)于冰凍切片的染色效果很多文獻(xiàn)資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時(shí),可以考慮嘗試進(jìn)行抗原修復(fù)。從原理上來(lái)看,無(wú)論冰凍切片還是細(xì)胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定的樣品,進(jìn)行抗原修復(fù)都會(huì)有效去除蛋白之間的交聯(lián),充分暴露抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。

規(guī)格說(shuō)明:
一個(gè)包裝的本產(chǎn)品可以配制成500毫升抗原修復(fù)液(1X)。按照每個(gè)片子需要10毫升抗原修復(fù)液(1X)計(jì)算,一個(gè)包裝的本產(chǎn)品可以用于50個(gè)樣品。按照每個(gè)片子需要5毫升抗原修復(fù)液(1X)計(jì)算,則一個(gè)包裝的本產(chǎn)品可以用于100個(gè)樣品。

操作方法:
對(duì)于石蠟切片:
脫蠟:切片在二甲苯中脫蠟5分鐘,再換用新鮮的二甲苯脫蠟,共用二甲苯脫蠟3次。無(wú)水乙醇5分鐘,兩次。90%乙醇5分鐘,兩次,70%乙醇5分鐘,一次。蒸餾水5分鐘,兩次。
抗原修復(fù):將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中,室溫孵育5分鐘。用免疫染色洗滌液洗滌3~5次,每次3~5分鐘,以充分去除殘留的SDS等試劑。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

對(duì)于冰凍切片:
用免疫染色洗滌液洗滌切片5分鐘。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,室溫孵育約5分鐘。用免疫染色洗滌液洗滌3~5次,每次3~5分鐘,以充分去除殘留的SDS等試劑。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

對(duì)于其它樣品的抗原修復(fù),可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進(jìn)行。

注意事項(xiàng):
抗原修復(fù)過(guò)程可以使用染色缸和染色架或郵寄夾進(jìn)行操作。塑料染色缸、染色架和郵寄夾可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免驟冷驟熱導(dǎo)致的玻璃破碎。
本抗原修復(fù)液使用前必須先充分溶解并混勻,然后用重蒸水或MilliQ水稀釋5倍,配制成抗原修復(fù)液(1X)。

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