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白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚紫微板法)用途

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產品名稱:白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚紫微板法)
英文名稱:BCIP/NBTAlkalinePhosphataseColorDevelopmentKit
分類:生化檢測
規格:100T
用途:用于人或動物血清、血漿、組織等樣本中的蛋白含量測定,該法操作簡單、方法特異,既可手工操作,又可采用自動分析儀檢測。
注意事項:檢測原理是在酸性環境下,白蛋白分子帶正電荷,與帶負電荷的溴甲酚紫(Bromocresolpurple,BCP)結合生成綠色復合物,在603nm處有吸收波,該復合物的吸光度與白蛋白濃度成正比,與同樣處理的白蛋白標準比較,求得待測樣品中白蛋白濃度。

簡介:
總蛋白(Total?Protein,TP)由白蛋白和球蛋白組成,檢測白蛋白的方法有雙縮脲法、色-氨酸法、染料結合法。檢測白蛋白的染料結合法可采用溴甲酚綠或溴甲酚紫染料結合,上述染料對白蛋白具有高度的親和力,通常監測染料與白蛋白結合的初速率,該速率與樣品中白蛋白濃度成正比。白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚紫微板法)檢測原理是在酸性環境下,白蛋白分子帶正電荷,與帶負電荷的溴甲酚紫(Bromocresol?purple,BCP)結合生成綠色復合物,在603nm處有吸收波,該復合物的吸光度與白蛋白濃度成正比,與同樣處理的白蛋白標準比較,求得待測樣品中白蛋白濃度。本試劑盒多用于人或動物血清、血漿、組織等樣本中的蛋白含量測定,該法操作簡單、方法特異,既可手工操作,又可采用自動分析儀檢測。本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

自備材料:
1.離心管、小試管
2.96孔板
3.酶標儀

操作步驟(僅供參考):

1.取白蛋白標準配制液或稀釋液加入到白蛋白標準中,充分溶解后配制成40mg/ml的白蛋白標準溶液,配制后可立即使用,溶解后的白蛋白標準溶液應-20℃保存。亦可按自己試驗要求繼續進行稀釋,如稀釋至1mg/ml。特別提示:待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,白蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測蛋白溶解于蔗糖中,亦取白蛋白標準溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作為溶解白蛋白標準品的稀釋液。

2.樣本處理:血清、血漿樣本直接取檢測。對于組織樣本,組織質量(g):生理鹽水比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴下勻漿后,離心,取上清待檢。

3.白蛋白加樣操作,按下表依次加入試劑:
加入物(μL)                         空白孔    標準孔   待測孔
白蛋白標準配制液                    5        -        -
白蛋白標準溶液(40mg/ml)            -       5        -
待檢樣品(血清、血漿、組織勻漿液)    -       -        5
BCP試劑                            250      250     250

4.先在酶標儀處以空白管調零,逐管加入BCP試劑,并立即混勻。

5.放置(30±3)s,讀取標準孔和各待測孔的吸光度。

6.當遇到脂血混濁,可設“樣本空白孔":取待測樣品加入白蛋白標準配制液,予以校正。

計算:
白蛋白(g/L)=(待測孔吸光度/標準孔吸光度)×白蛋白標準液濃度(g/L)

參考區間:健康成年人    36~46g/L

注意事項:
1.白蛋白標準粉末溶解于白蛋白標準配制液后,即獲得白蛋白標準原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續檢測,該蛋白標準原液-20℃長期保存。
2.如果沒有分光光度計,也可以使用酶標儀測定。使用酶標儀測定蛋白濃度時,每個試劑盒可以測定的樣品數量可能會顯著增加。
3.本法線性范圍是10~50g/L,在10~40g/L呈良好線性范圍。
4.CV可達0.45%,回收率可達99.3%~102%,平均回收率達100.5%。
5.該法測定正常樣本的批間變異系數為6.3%。

有效期:6個月有效。白蛋白標準配制成溶液后應-20℃凍存。

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